[发明专利]一种基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器有效
申请号: | 201710819041.7 | 申请日: | 2017-09-12 |
公开(公告)号: | CN107505300B | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 于海东;宗丽君;李林;张承武;刘志鹏;刘金华;黄维;欧阳启然;赖琼宇;朱成显;焦钰翠;高磊 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/533 |
代理公司: | 32207 南京知识律师事务所 | 代理人: | 吴频梅 |
地址: | 210009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星NOR的微流体纸基传感器,属于生物纳米技术领域。该传感器的制备方法包括:首先,在色谱纸上通过喷蜡打印技术,形成亲水区域与疏水区域,烘烤一定时间并将纸进行等离子体处理;其次,制备NOR‑牛血清白蛋白BSA涂层抗原和量子点标记的NOR抗体;再次,将涂层抗原与羊抗鼠二抗分别加入到上下平行的白色纸区域中,并将NOR与量子点标记的抗体混合物加入到涂层区,将纸对折,溶液渗透到二抗区;最后,利用免疫分析测定,最终通过荧光信号定量检测牛奶中的诺氟沙星。本发明提供了一种成本低、操作简单、灵敏度高、检测限低、快速检测NOR的纸基传感器。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 荧光 免疫 分析 用量 作为 标记 检测 牛奶 诺氟沙星 流体 传感器 | ||
【主权项】:
1.一种基于荧光免疫分析用量子点作为标记检测牛奶中诺氟沙星的微流体纸基传感器,其特征在于:包括以下步骤:/n(1)设计纸基模型,在色谱纸上,利用喷蜡打印机打印所需模型,所述设计纸基模型为亲水区域与疏水区域,亲水区域第一行为涂层区、第二行为二抗区,烘烤后,等离子体处理所述的纸基模型;/n(2)诺氟沙星牛血清白蛋白NOR-BSA涂层抗原的制备;/n(3)量子点标记的诺氟沙星NOR抗体的制备;/n(4)配制不同浓度的NOR,并与步骤(3)中的量子点标记的诺氟沙星NOR抗体混合;/n(5)在步骤(1)所得的色谱纸的涂层区加入步骤(2)制备的NOR-BSA,在步骤(1)所得的色谱纸的二抗区加入羊抗鼠二抗,反应15-30min后,用磷酸缓冲盐溶液PBS洗涤,用牛血清白蛋白BSA阻隔后再洗涤;/n(6)将步骤(4)中的混合溶液加入到涂层区;反应2-5min后,将色谱纸对折,涂层区与二抗区重叠,再反应2-5min后洗涤;/n(7)利用荧光分光光度计分别检测涂层区与二抗区的荧光。/n
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