[发明专利]一种抗凝血女贞花多糖及其提取分离方法和应用

摘要

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种抗凝血女贞花多糖及其提取分离方法和应用。该提取分离方法是将女贞花经脱脂、水提醇沉获得粗多糖，然后将除蛋白、脱色后的粗多糖用DEAE‑52纤维素色谱柱、Sephadex G‑100凝胶色谱柱进一步纯化而得。本发明对该多糖的体外凝血效果进行考察，结果表明该多糖有良好的抗凝血作用，可用于制备抗凝血药物。

主权项

抗凝血女贞花多糖的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）新鲜的女贞花，阴干、粉碎，用石油醚回流脱脂，残渣挥干石油醚后，用乙醇浸提，所得残渣挥发至无醇味，用超纯水加热提取，趁热抽滤，合并滤液后减压浓缩至原体积的1/4左右，再向浓缩液中加入乙醇，静置、离心，得到的沉淀加超纯水溶解透析以除去小分子杂质，透析液进行醇沉，得到的多糖沉淀冷冻干燥即得女贞花粗多糖；（2）取除蛋白、脱色后的女贞花粗多糖，用超纯水溶解、过滤后加入到DEAE‑52纤维素色谱柱，依次用超纯水、0.1 mol/L、0.2 mol/L、0.3 mol/L 的NaCl溶液进行洗脱，洗脱液采用苯酚‑硫酸法进行检测，测490 nm处的吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，合并同一洗脱峰的多糖样品，透析、浓缩后冷冻干燥；其中，0.1 mol/L NaCl溶液的洗脱峰为组分LL‑1，0.2 mol/L NaCl溶液的洗脱峰为组分LL‑2，0.3 mol/L NaCl溶液的洗脱峰为组分LL‑3；（3）组分LL‑1用超纯水溶解、过滤后加入到Sephadex G‑100凝胶色谱柱，用超纯水洗脱，采用苯酚‑硫酸法进行检测，在波长490 nm处测其吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，得到两组洗脱峰，浓缩第1组洗脱峰，冷冻干燥得到的多糖命名为LLp‑1a；（4）组分LL‑3采用步骤（3）组分LL‑1相同的方法进行洗脱，得到单一洗脱峰，冷冻干燥得到的多糖命名为LLp‑3；LLp‑1a和/或LLp‑3即为抗凝血女贞花多糖。