[发明专利]一种加拿大糖槭组织培养快繁的方法

摘要

本发明公开了一种加拿大糖槭组织培养快繁的方法，属于木本植物组织培养繁育技术领域。本发明包含外植体选择、外植体预处理、无菌体系的建立、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗驯化等步骤。利用植物的组织器官，在无菌体系条件下，通过人工控制外界环境条件进行培养，达到快速繁殖苗木的目的，有效保持优良母本的稳定性状。与常规的扦插及嫁接无性繁殖技术相比，本技术取材量小，避免了自然条件的制约，繁殖系数高达5‑20倍，更适用于新引种植物，解决因其资源不足，造成的繁殖和推广问题。

主权项

1.一种加拿大糖槭组织培养快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体选择选取多年生健壮、无病虫害的加拿大糖槭，以其当年生、未木质化的嫩枝作为外植体；(2)外植体预处理将步骤(1)中的外植体除去叶片、叶柄，75％酒精擦拭后，修剪成至少带一个腋芽或顶芽的茎段，然后用洗洁精震荡清洗；接着将茎段浸泡在纯水中并置于温度为18‑22℃下的超声波清洗器中处理，之后用纯水冲洗；(3)无菌体系的建立将经步骤(2)处理后外植体在无菌操作台中用75％酒精浸泡消毒，用无菌水冲洗，用0.1％氯化汞震荡消毒，用无菌水冲洗，吸干，再切除茎段两端消毒死亡部分后获得无菌材料；(4)诱导培养在MS培养基的基础上添加6‑BA0.5mg/L，蔗糖30g，琼脂6.5g，配置诱导培养基，调节诱导培养基pH至5.8；将步骤(3)无菌材料形态学下端插入诱导培养基中进行芽的分化诱导培养，促进芽的萌发和生长；(5)增殖培养在MS培养基的基础上添加6‑BA0.5mg/L，GA₃ 0.5mg/L，蔗糖30g，琼脂6.5g，配置继代培养基，调节继代培养基pH至5.8，将步骤(4)中的加拿大糖槭腋芽整个接入继代培养基进行增殖培养；(6)根的诱导在MS培养基的基础上添加IBA0.5mg/L，蔗糖20g，琼脂6.5g，配置生根培养基，调节生根培养基pH至5.8，将步骤(5)的幼苗接入生根培养基进行生根诱导；(7)无菌苗的炼苗驯化将步骤(6)的加拿大糖槭生根无菌苗从培养室移至温室大棚培养，然后移入轻基质中继续培育成完整的再生植株；其中轻基质由营养土、河沙和珍珠岩以2∶1∶1的体积比混合并用高锰酸钾消毒制成。