[发明专利]一种黑骨藤指纹图谱的建立方法

摘要

本发明公开了一种黑骨藤指纹图谱的建立方法，所述方法可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣，具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点；用该方法还能较为全面地反映黑骨藤中所含化学成分的种类与数量，进而对其质量进行整体描述和评价，可将黑骨藤质量与其药效真正结合起来，有助于阐明其作用机理为本黑骨藤的技术提升与深度开发提供了依据。且用该方法检测到的黑骨藤指纹图谱化学成分相对较多、各特征峰高度比例适中，分离度较好。

主权项

一种黑骨藤指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：称取杠柳毒苷对照品8.00～8.50mg，置于10mL容量瓶中，加入甲醇，使其充分溶解，摇匀，用甲醇定容，配制成质量浓度为0.80～0.85mg·mL‑1的对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：称取黑骨藤样品1.5～2.5g,按料液比1:20～1:30加入65％～75％乙醇溶液45～55mL，加热回流提取2～4次，每次50～70min；提取液于70℃水浴蒸干，加20～30mL蒸馏水使成混悬液；分别依次用和混悬液等量的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取2～4次，取正丁醇萃取部位，浓缩至干，残渣用适量甲醇溶解，转移并定容置于10mL容量瓶中，摇匀，0.40～0.50μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；(3)色谱条件：色谱柱：Xtimate C18(250mm×4.6mm,5μm)；检测波长：200～240nm；柱温：20～30℃；进样量：10μL；流动相：乙腈‑0.05％～0.15％磷酸水溶液，梯度洗脱，流速：0.8～1.2mL·min‑1；(4)指纹图谱的制作：按上述方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样，记录谱图得到黑骨藤指纹图谱；(5)指纹谱图的确认：按照上述提供的方法，对多批次黑骨藤建立了指纹图谱，通过分析比较确定了16个共有峰，这些共有峰构成了黑骨藤的指纹特征，作为黑骨藤的指纹图谱。