[发明专利]一种鉴定家养绵羊是否含有盘羊血缘的方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域，公开了一种鉴定家养绵羊是否含有盘羊血缘的方法。包括：个体DNA提取；Primer 5.0软件设计包含绵羊mtDNA D‑Loop序列的引物，以提取的DNA为模板，进行PCR扩增；扩增的PCR产物测序，DNAstar软件对测序结果进行整理、拼接、组装；从NCBI数据库中下载家养绵羊mtDNA D‑loop单倍型A和B的序列及摩弗仑羊、东方盘羊、羱羊、盘羊维式亚种、盘羊哈萨克斯坦亚种、盘羊蒙古亚种、盘羊西藏亚种和盘羊指名亚种的序列；ClustalW软件对以上序列进行多重比对，Mega 6.06的Neighbor‑Joining程序构建进化关系树，以此准确鉴定。

主权项

一种鉴定家养绵羊是否含有盘羊血缘的方法，其特征在于，所述鉴定家养绵羊是否含有盘羊血缘的方法包括以下步骤：步骤一，贾洛羊血样样品或组织样品的采集，个体DNA提取；步骤二，依据NCBI数据库中登录号为NC001941的家养绵羊mtDNA全序列，采用Primer 5.0设计引物，以贾洛羊的DNA样本为模板，进行mtDNA D‑loop全序列的PCR扩增；步骤三，扩增的mtDNA D‑loop的PCR产物，送测序公司进行mtDNA D‑loop序列的测序，DNAstar软件进行贾洛羊mtDNA D‑loop的测序结果进行整理、拼接、组装；步骤四，从NCBI数据库中下载家养绵羊mtDNA D‑loop单倍型A和单倍型B的序列及欧洲野绵羊‑摩弗仑羊、东方盘羊、羱羊、盘羊维式亚种、盘羊哈萨克斯坦亚种、盘羊蒙古亚种、盘羊西藏亚种和盘羊指名亚种序列；步骤五，采用ClustalW软件对家养绵羊mtDNA D‑Loop单倍型A和B、NCBI数据库中下载的mtDNA D‑Loop序列及贾洛羊的mtDNA D‑Loop序列进行多重序列比对，比对后的序列再用Mega 6.06软件的Neighbor‑Joining程序构建进化关系树，判断摩弗仑羊、东方盘羊、羱羊及盘羊各亚种是否与贾洛羊的单倍型A、单倍型B和单倍型C归为一类，确定贾洛羊与摩弗仑羊、东方盘羊、羱羊及盘羊各亚种间存在共同的祖先或共有血缘关系。