[发明专利]鉴别鲜冬虫夏草的特征蛋白质组合及发现方法和应用有效
| 申请号： | 201710856136.6 | 申请日： | 2017-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN107831260B | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 钱正明;甄达明;李文庆;李文佳;李春红 | 申请（专利权）人： | 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/89 | 分类号： | G01N30/89;G01N30/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 523808 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及中药材鉴别领域，具体涉及鉴别鲜冬虫夏草的特征蛋白质组合，其特征在于，所述特征蛋白质组合选自A1、A2、A3、A4、A5或A6，或它们任意组合。该蛋白质组合是通过将样品进行前处理后利用液质联用LC‑MS分子筛选技术进行测定，所述的色谱条件为：色谱柱：Sepax Bio‑C4；填充剂：四烷基硅烷键合硅胶；流动相：A为0.1％甲酸‑水，B为0.1％甲酸‑乙腈；梯度洗脱；分子扫描模式：SIM模式。本发明的结果表明与现有技术相比具有以下优点和积极的效果：首次采用LC‑MS筛选分子技术得到了冬虫夏草的6种特征蛋白质，筛选分子特异性高，最后将此特征蛋白应用于冬虫夏草真伪鉴别中，图谱结果直观明了，准确可靠，可为冬虫夏草的质量控制提供参考。 | ||
| 搜索关键词： | 鉴别 冬虫夏草 特征 蛋白质 组合 发现 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种发现鉴别鲜冬虫夏草的特征蛋白质组合的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备冬虫夏草供试品溶液；/n(2)使用LC-MS技术测定供试品溶液得到蛋白质特征图谱，其中，/n高效液相色谱条件：所用的色谱柱为反相色谱柱，所述的反相色谱柱的填充剂为四烷基硅烷键合硅胶；流动相A为0.1％甲酸-水，流动相B为0.1％甲酸-乙腈；/n梯度洗脱条件：/n0min→22min：20％B→31％B；/n22min→23min：31％B→90％B；/n23min→28min：90％B→90％B；/n质谱条件：离子源：Dual-ESI；离子化模式：正离子；扫描模式：SIM；干燥气温度：350℃；干燥气流速：10L/min；雾化器压力：50psi；毛细管电压：3500V；筛选离子时间及质荷比：/n通道1：/nA1：0-12.5min筛选离子包括870.8，922.1，979.7，1045，1119.5，1205.5；/nA2：12.5-15min筛选离子包括958.5，1026.8，1105.7，1147.1，1197.8，1306.7，1596.8；/nA3：15-18min筛选离子包括817.0，871.4，933.4，1005.2，1088.9，1187.7；/nA4：18-24min筛选离子包括981.7，1015.5，1051.6，1090.4，1132.3，1177.7，1226.6，1280，1338；/n通道2：/nA5：0-15min筛选离子包括969.4，1038.5，1118.2，1211.4，1321.1，1453.4，1596.6；/nA6：15-24min筛选离子包括821.3，876.1，938.6，1010.7，1094.8，1194.3。/n
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