[发明专利]用于内源性过表达lncRNA-XIST的gRNA靶点序列及其应用有效
申请号: | 201710857335.9 | 申请日: | 2017-09-21 |
公开(公告)号: | CN107513531B | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | 黄璐;应豪;陈道桢;朱云龙;陈忠;顾颖;蒋盘华;陈慧娟 | 申请(专利权)人: | 无锡市妇幼保健院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王茹;王锋 |
地址: | 214000*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于内源性过表达lncRNA‑XIST的gRNA靶点序列、CRISPR/dCas9慢病毒系统及其应用。所述的gRNA靶点序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示。所述的CRISPR/dCas9慢病毒系统包含所述的用于内源性过表达lncRNA‑XIST的gRNA靶点序列。本发明利用慢病毒必须整合到宿主基因组的特性来筛选稳定株的方法,配合CRISPR/dCas9实现对大片段基因lncRNA‑XIST的内源过表达,克服了传统方法无法稳定表达大片段基因lncRNA‑XIST的弊端,可以在短时间内获得高效率的大片段基因lncRNA‑XIST过表达稳定细胞株,筛选得到的细胞或者可稳定表达目的基因,从而得到稳定沉默lncRNA‑XIST下游特定基因的细胞株,对于lncRNA‑XIST在滋养细胞迁移中的功能和在增殖障碍、胎儿生长受限发生中的作用的研究具有重要指导意义。 | ||
搜索关键词: | 用于 内源 表达 lncrna xist grna 序列 及其 应用 | ||
【主权项】:
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