[发明专利]用于预测肝癌发生风险的试剂盒及方法

摘要

本发明涉及一种用于预测肝癌发生风险的试剂盒及方法，涉及医学体外诊断技术领域，具体地说是通过SCT、NFIX、IGF2、ABCG5、GSTO2、SARDH、E2F6、SHANK2、GATA4、OPLAH、NR2F1和ZFHX3中单基因或多基因的CpG岛甲基化状态对肝癌发生的风险进行预测的试剂盒及方法。本发明多个基因的联合甲基化检测，灵敏度得到极大提高；对唾液、尿液、血液等的游离核酸进行检测，无需从癌组织中取材，检测无创，且操作简便。

主权项

1.一种用于预测肝癌发生风险的试剂盒，所述试剂盒为基于重亚硫酸盐转化的甲基化特异性荧光PCR试剂盒，其特征在于：包括：游离DNA提取液、针对十二个目的基因SCT、NFIX、IGF2、ABCG5、GSTO2、SARDH、E2F6、SHANK2、GATA4、OPLAH、NR2F1和ZFHX3的引物探针对Ⅰ和内参基因ACTB非甲基化引物探针对Ⅰ；所述SCT基因的引物探针对包括两种，分别为：SCT上游引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，SCT下游引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，SCT探针1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；SCT上游引物2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，SCT下游引物2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，SCT探针2的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；NFIX上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，NFIX下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，NFIX探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；IGF2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，IGF2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，IGF2探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；ABCG5上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，ABCG5下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示，ABCG5探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示；GSTO2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，GSTO2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，GSTO2探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示；SARDH上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，SARDH下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示，SARDH探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示；E2F6上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示，E2F6下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示，E2F6探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示；SHANK2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示，SHANK2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示，SHANK2探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示；GATA4上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示，GATA4下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示，GATA4探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示；OPLAH上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示，OPLAH下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示，OPLAH探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示；所述NR2F1基因的引物探针对包括两种，分别为：NR2F1上游引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO.34所示，NR2F1下游引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO.35所示，NR2F1探针1的核苷酸序列如SEQ ID NO.36所示；NR2F1上游引物2的核苷酸序列如SEQ ID NO.37所示，NR2F1下游引物2的核苷酸序列如SEQ ID NO.38所示，NR2F1探针2的核苷酸序列如SEQ ID NO.39所示；ZFHX3上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.40所示，ZFHX3下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.41所示，ZFHX3探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.42所示；ACTB上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.43所示，ACTB下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.44所示，ACTB探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.45所示。