[发明专利]一种创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法

摘要

本发明公开一种创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法，属于植物种质资源创新领域。该方法通过选择含墨兰基因组的杂交兰为核心亲本配置杂交组合，通过单种子离体培养评价杂交后代的中间繁殖体类型及其组培快繁能力，并进行试管苗生产，对生产出的试管苗进行鉴定和移栽，从而获得易工厂化繁殖的墨兰资源。本发明提供的方法在试管内完成易工厂化墨兰资源的选择，与现有育种移栽成苗后再进行选择相比，显著缩短育种年限，节约人力物力；且能够真正改善传统墨兰的组培快繁能力，获得易工厂化繁殖的墨兰新资源，实现墨兰种苗工厂化生产，对推动墨兰产业化发展有重要现实意义。

主权项

1.一种创建易工厂化繁殖墨兰资源的方法，其特征在于包括以下步骤：/nS1. 亲本选择与杂交组合配置：根据育种目标，选择含墨兰基因组的杂交兰为核心亲本配置杂交组合，获得果实；/nS2. 单种子培养与中间繁殖体形态及增殖能力鉴定：对杂交后代种子进行无菌播种获得中间繁殖体，对单粒种子形成的中间繁殖体进行继代培养，观测中间繁殖体增殖能力和类型，选择增殖能力强且为根状茎类型的中间繁殖体；/nS3. 植株再生与再生能力及试管苗形态鉴定：对中选的中间繁殖体进行植株再生，观测其再生成苗能力和试管苗形态，选择植株再生能力强且试管苗形态为墨兰型或似墨兰型的株系；/nS4. 易工厂化繁殖墨兰资源的获得：对获得的株型为墨兰型或似墨兰型的试管苗进行移栽和栽培，即获得易工厂化繁殖墨兰资源；/n步骤S1中按照母本为含墨兰基因组的杂交兰、父本为墨兰；或母本为墨兰、父本为含墨兰基因组的杂交兰；或父母本均为含墨兰基因组的杂交兰配置杂交组合；/n步骤S2所述的单种子培养与中间繁殖体形态及增殖能力鉴定包括以下步骤：/nS21. 果实消毒、接种和初代培养：将杂交后150～190天的果实洗净，然后用75%乙醇消毒7～10分钟，无菌水冲洗2～4次，取其内部种子接种到种子萌发培养基上培养；培养条件为温度26±1℃，暗培养；所述的种子萌发培养基配方为MS培养基 + 0.3～1.0mg/L 6-BA +0.1～0.5mg/L NAA + 10～20%椰子汁 + 20～40g/L蔗糖+0.3～0.5g/L活性炭+ 7～8g/L卡拉胶；/nS22. 中间繁殖体的增殖：将种子萌发后形成的中间繁殖体分开，单独接种于增殖培养基上培养，形成中间繁殖体系；培养条件为温度26±1℃，每日光照8～12小时，光照强度500～1000lux；/nS23. 中间繁殖体增殖能力和形态鉴定：对各中间繁殖体系的形态进行观察，选择形态为根状茎的中间繁殖体系；将根状茎掰成长度0.7～1.3cm的小段于增殖培养基上进行增殖培养，选择增殖60天后增殖系数大于2.0的中间繁殖体系；/n步骤S22和S23中所述的增殖培养基配方为MS培养基 + 0.5～2.0mg/L 6-BA + 0.1～0.5mg/L NAA + 0～20%椰子汁 + 20～40g/L蔗糖 + 0.3～0.5g/L活性炭+ 7～8g/L卡拉胶；/n步骤S3中所述植株再生与再生能力及试管苗形态鉴定包括如下步骤：/nS31. 分化培养：将增殖培养后根状茎直接或分开转接到分化培养基上培养，每瓶接8～15条或块；培养条件为温度26±1℃，每日光照10～12小时，光照强度1000～1200lux；所述的分化培养基配方为MS培养基 + 1.0～3.0mg/L 6-BA + 0.1～0.5mg/L NAA + 20～40g/L蔗糖 + 0.01～0.3g/L活性炭 + 7～8g/L卡拉胶；/nS32. 生根壮苗培养：将株高3～5cm的芽或苗从根状茎上掰下，接种到生根壮苗培养基上培养，每瓶接8～10株；培养条件为温度26±1℃，每日光照10～12小时，光照强度1200～2000lux；/nS33. 再生能力和试管苗形态鉴定：观测根状茎分化和生根壮苗过程，选择易分化成苗、出叶时间间隔长、芽苗生长速度快的株系；对获得的试管苗形态进行观察，选择试管苗形态为墨兰型或似墨兰型的株系，即株型紧凑、叶姿直立、叶横截面形状近V字形的株系；/n步骤S32中所述的生根壮苗培养基配方为1/2MS培养基 + 0.1～0.2mg/L 6-BA + 0.5～2mg/L NAA + 20～40g/L蔗糖 + 0.3～0.5g/L活性炭+7～8g/L卡拉胶。/n