[发明专利]一种小花万代兰种苗无菌播种繁殖方法

摘要

一种小花万代兰种苗无菌播种繁殖方法，包括将小花万代兰蒴果消毒后，洗脱形成种子悬浮液，然后在一次成苗培养基进行培养，然后逐步增加光照强度，培养得小苗，大苗和生根苗；从培养瓶中取出所述生根苗，洗净附着在所述生根苗上的培养基后，用高锰酸钾溶液浸泡，然后将生根苗晾干至生根苗的根变白后栽培在基质上。本发明采用成熟的蒴果进行无菌播种、一次培养成苗，具有繁殖速度快、种苗品质优良、生长成本低等特点，只需要简单的组织培养设备就可以完成。

主权项

一种小花万代兰种苗无菌播种繁殖方法，其特征在于：包括下列步骤：第一步：将小花万代兰蒴果用酒精浸泡，然后用升汞溶液消毒，接下来用无菌水冲洗，再于无菌条件下用无菌滤纸吸干所述蒴果表面的水分；接着用无菌手术刀切开蒴果，将蒴果内的种子洗脱至一容纳有无菌水的容器内，制成种子悬浮液，然后用无菌水将所述种子悬浮液调整成浓度20~30粒种子/毫升的接种用种子悬浮液；第二步：无菌条件下，将所述接种用种子悬浮液移至一容纳有一次成苗固体培养基的兰花培养瓶中，每个所述兰花培养瓶中的种子数量为40~60粒；每升所述一次成苗培养基含有1~2g的花宝1号、1～2g的花宝2号、0.5～2g的蛋白胨、40~80g的土豆泥、50~100g的香蕉泥、10~20g的苹果泥、500~1000mg的活性碳、80~120mg的肌醇、1.5~2.5mg的甘氨酸、0.05~0.2mg的盐酸硫胺素、0.4~0.8mg的盐酸吡哆醇、0.4~0.8mg的烟酸、0.05~0.1mg的6‑苄基嘌呤、0.2~2 mg的萘乙酸、15～30g的蔗糖、6～7g的琼脂；所述一次成苗培养基的pH 值为5.4‑5.6；第三步：将所述培养瓶在温度为23~27℃，光照强度为100～1000 Lux的条件下培养60~90天，使种子萌发形成原球茎，原球茎长出根和叶片得到小苗；第四步：将所述小苗在24~28℃，光照强度为1000～3000 Lux的条件下培养，获得高度为3~5cm、叶片数量为3～5片、根须的数量为3～5条、根的长度为1～3厘米的大苗；第五步：将所述大苗在24~28℃，光照强度为3000～5000 Lux的条件下培养，获得高度为5~7cm、叶片数量为4片以上、根须的数量为5条以上、根的直径为3毫米以上的生根苗；第六步：从培养瓶中取出所述生根苗，洗净附着在所述生根苗上的培养基后，用高锰酸钾溶液浸泡，然后将生根苗晾干至生根苗的根变白后栽培在基质上。