[发明专利]奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 201710908690.4 申请日: 2017-09-29
公开(公告)号: CN107488676B 公开(公告)日: 2021-04-13
发明(设计)人: 金天明;林静;李小慧;高珂珂;尚翠玲;孟佳丽;李昕;赵瑞利 申请(专利权)人: 天津农学院
主分类号: C12N15/861 分类号: C12N15/861;C12N7/01;A61K38/47;A61P15/14;A61P31/04;A61K38/16
代理公司: 天津市鼎和专利商标代理有限公司 12101 代理人: 崔继民
地址: 300384 *** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公开了一种奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用。试验中选取奶牛乳房炎主要致病菌特异性蛋白,通过ABCpred方案与BepiPred方案预测获得每种蛋白的2个B细胞优势表位将所得优势表位进行连接获得TRE序列,GeneBank上得到cLYZ序列并进行哺乳动物细胞偏好性密码子优化。在TRE序列与cLYZ序列之间插入高剪切效率的Thoseaasigna virus 2A(T2A)自剪切肽,合成后得到含有目的基因片段的pMD‑19T载体。将TRE基因、T2A基因、cLYZ基因亚克隆到穿梭载体pDC315‑MCS‑EGFP上;利用LipoFiterTM脂质体转染法将重组穿梭载体与腺病毒大骨架pBHGlox(delta)E1,3cre共转染HEK293细胞,实现同源重组,获得重组腺病毒Ad‑TRE‑T2A‑cLYZ‑EGFP。
搜索关键词: 奶牛 乳房 致病菌 三联 基因 石斑鱼 型溶菌酶 重组 病毒 构建 方法 应用
【主权项】:
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