[发明专利]一种白菜CRISPR‑Cas9基因编辑体系的建立及其应用在审
| 申请号： | 201710949078.1 | 申请日： | 2017-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN107557381A | 公开（公告）日： | 2018-01-09 |
| 发明（设计）人： | 张昌伟;杨洋;侯喜林;刘同坤;张茹佳;高立伟;李英;肖栋;王建军;胡春梅 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N1/21;A01H5/02 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司32218 | 代理人： | 徐冬涛,李晓峰 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种白菜CRISPR‑Cas9基因编辑体系的建立及其应用。设计两对sgRNA引物sGAvrIIF1/sGR1和sGF2/sGAvrIIR2，分别以pChimera sgRNA vector为模板进行PCR扩增，分别取纯化目的片段以sGAvrIIF1/sGAvrIIR2为引物进行融合PCR；将载体pCAS9‑TPC与融合PCR产物酶切后融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，获得阳性菌落进行培养提取质粒得到植物基因编辑载体。通过本发明，可简单有效的实现了对白菜的基因编辑，对白菜转基因体系的建立也奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 白菜 crispr cas9 基因 编辑 体系 建立 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种CRISPR‑Cas9介导的植物基因编辑载体，其特征在于：采用以下方法构建：设计两对sgRNA引物sGAvrIIF1/sGR1和sGF2/sGAvrIIR2，所述引物的序列分别为：sGAvrIIF1：GATCCTAGGAGCTTTCGTTGAACAACGGAAACTsGR1：GCTCTAAAAC(sgRNA反向互补序列)CAATCACTACTTCGACTCTAGCTGsGF2：AGTAGTGATT(sgRNA正向序列)GTTTTAGAGCTAGAAATAGCAAGTsGAvrIIR2：GATCCTAGGGCCATTTGTCTGCAGAATTGGCGC；分别以pChimera sgRNA vector为模板进行PCR扩增，分别取纯化目的片段以sGAvrIIF1/sGAvrIIR2为引物进行融合PCR；将载体pCAS9‑TPC与融合PCR产物酶切后融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，获得阳性菌落进行培养提取质粒得到植物基因编辑载体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京农业大学，未经南京农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710949078.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
