[发明专利]一种含鱼肉基质的副溶血性弧菌标准物质

摘要

本发明属于食品微生物技术领域，具体涉及一种含鱼肉基质的副溶血性弧菌标准物质，其具体经保存液的配制、基质预处理、混悬液的配制、标准物质的制备及菌种鉴定、均匀性验证、定值、稳定性检验，制得含菌数为100~350 CFU/瓶的成品。所得含鱼肉基质的副溶血性弧菌标准物质具有良好的均匀性，可解决现有标准物质中鱼肉基质难溶于水的问题，且其品质稳定、质量可控，适用于微生物高效、准确的定量检测。

主权项

一种含鱼肉基质的副溶血性弧菌标准物质，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：1）保存液的配制：将副溶血性弧菌标准菌株冻干粉用3%氯化钠碱性蛋白胨水溶解后于36±1 ℃培养8～18 h，后于弧菌显色培养基平板上划线分离，在36±1 ℃恒温培养18～24 h；然后挑取单菌落接种于3%氯化钠碱性蛋白胨水中，36±1 ℃培养8～18 h；吸取500 μL菌液于无菌离心管中，加入500 μL质量浓度为40%的无菌甘油，混合，制成保存液；2）基质预处理：鱼肉剔除脂肪组织和筋，冷冻干燥后脱水率为76%。然后将脱水鱼肉粉碎至组织细度为50目，采用60Coγ辐射灭菌后分装备用；3）混悬液的配制：按1g鱼肉基质加入9mL无菌水的比例，将预处理后的鱼肉基质与水混合成基质悬液，再加入其3倍体积的保护剂，混合制得混悬液；4）标准物质的制备：取步骤1）制备的保存液20 μL加于200 mL3%氯化钠碱性蛋白胨水中36±1 ℃下进行培养，并利用多功能酶标仪定时取样测定培养液的OD600 nm值，当OD600 nm为0.335±0.1时停止培养，得新鲜菌液，然后将新鲜菌液按混悬液体积浓度1%加入到步骤3）制得的混悬液中，于恒温振荡器上300r/min摇匀30min，再按2mL/瓶进行分装，其含菌量为4.5×104~6.1×104CFU/mL，最后经冷冻干燥，制得标准物质；5）检验：将所得标准物质进行菌种鉴定、均匀性验证、定值、稳定性检验，制得成品。