[发明专利]一种小花山奈的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种小花山奈的组织培养快速繁殖方法。该方法包括外植体前处理、芽基部增殖、丛生芽诱导、继代增殖、生根壮苗和炼苗移栽。将消毒好的芽基部外植体接种到增殖培养基上培养，直至外植体基部形成球状；切割增殖的芽基部，转接到丛生芽诱导培养基上诱导丛生芽；当继代丛生芽苗高4～6cm时，切下丛生芽转移至壮苗生根培养基上进行培养，当壮苗生根培养基上的苗高6～8cm时，在温室自然光照下炼苗7～10d，取出苗，洗净根部培养基，培养后得到移栽苗。本发明可在短期内获得能保持母株优良性状的组培苗，对母株损伤不大，投入低产出高，可提供大量的小花山奈组培苗。

主权项

1.一种小花山奈的组织培养快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：/n（a）外植体前处理：采集小花山奈的根茎清洗干净，剪掉根茎上的须根后，消毒后晾干；再放入洗净消毒的河沙中，恒温发芽，至根茎芽的芽高为2～5 cm，洗净根茎芽，切掉根茎芽上的茎尖后留下的1～2 cm的芽基部为外植体材料；/n（b）芽基部增殖：将消毒好的芽基部外植体接种到增殖培养基上培养，直至外植体基部形成球状；/n（c）丛生芽诱导：切割增殖的芽基部，转接到诱导培养基中诱导丛生芽；所述诱导培养基成分为MS、6-苄氨基腺嘌呤3.0～5.0 mg/L、奈乙酸0.01～0.10 mg/L、椰汁10.0～15.0%、蔗糖20～30 g/L、卡拉胶粉9.5～10.0 g/L；/n（d）继代增殖：将诱导出的不定芽切掉叶片和茎后留芽基部，继代培养于增殖培养基中继续增殖芽基部；/n（e）生根壮苗：当继代丛生芽苗高4～6 cm时，切下接种到生根培养基中，所述生根培养基成分为MS、奈乙酸0.10～0.50 mg/L、香蕉泥10.0～15.0%、活性炭0.5～1.0 g/L、蔗糖20～30 g/L、卡拉胶粉9.5～10.0 g/L；/n（f）炼苗移栽：当生根培养基上的苗高6～8 cm时，在温室自然光照下炼苗7～10 d，取出瓶苗，洗净根部培养基，消毒后，移栽到泥炭类基质中，保持通风透气，湿度在70～85%，温度在20～32℃，自然光照条件培养后得移栽苗；/n步骤（b）和步骤（d）所述的增殖培养基成分为MS、6-苄氨基腺嘌呤8.0～10.0 mg/L、奈乙酸0.01～0.10 mg/L、椰汁10.0～15.0%、蔗糖20～30 g/L、卡拉胶粉9.5～10.0 g/L。/n