[发明专利]一种测定板蓝根药材及其制品中R-告依春和S-告依春含量的方法

摘要

本发明公开了一种测定板蓝根药材及其制品中R‑告依春和S‑告依春含量的方法，所述方法包括：标准曲线的制作、供试品溶液的制备和含量测定步骤，所述供试品溶液的制备是首先对待测定的板蓝根药材或其制品进行回流提取或超声提取，然后对提取液用固相萃取柱进行洗脱，收集的洗脱液经过氮吹干燥后的残渣经溶解、过滤得到；所述含量测定是采用高效液相‑紫外‑圆二色谱法。本发明通过所述方法首次实现了对板蓝根药材及其制品中的R‑告依春和S‑告依春这对对映异构体含量的分别测定，无需使用手性色谱柱就可以快速、简便、准确、高精度测定R‑告依春和S‑告依春这对对映异构体的含量，对监测板蓝根药材及其制品的质量具有显著应用价值。

主权项

1.一种测定板蓝根药材及其制品中R-告依春和S-告依春含量的方法，包括：标准曲线的制作、供试品溶液的制备和含量测定步骤，其特征在于：/na)所述供试品溶液的制备方法如下：/n精密称取待测定的板蓝根药材或其制品，用去离子水进行回流提取或超声提取；过滤提取液，将所得滤液上样至固相萃取柱中，先用水冲洗，然后用甲醇洗脱，上样和洗脱过程均需控制流速≤1滴/秒；收集甲醇洗脱液，氮吹至干燥，残渣再用甲醇溶解，过滤，所得滤液即为供试品溶液；/nb)所述含量测定采用高效液相-紫外-圆二色谱法，具体测定条件为：采用C18色谱柱，紫外检测器和圆二色检测器；流动相由A相与B相按体积比为10：90～15：85组成，其中A相为100％乙腈，B相是质量浓度为0.02％～0.03％的磷酸水溶液；流动相流速为0.5～1.0mL/分钟；紫外检测波长为230nm，圆二色检测波长为280nm；柱温为30℃；进样量为10μL；采集紫外色谱峰面积A和圆二色谱峰面积ΔA；具体步骤如下：/n1)精密称定R,S-告依春对照品适量，用甲醇配制成浓度为0.05～0.6mg/mL的R,S-告依春对照品溶液；/n2)采用高效液相色谱柱-紫外检测器测定供试品，采集供试品的紫外色谱峰面积A，并以外标法计算供试品中R,S-告依春的质量含量；/n3)采用高效液相色谱柱-圆二色检测器测定供试品，采集供试品的圆二色谱峰面积ΔA，由计算的g＝ΔA/A值和标准曲线，得到供试品中R-告依春的质量百分含量；/n4)由得到的R,S-告依春的质量含量和R-告依春的质量百分含量，计算得到R-告依春的质量含量，进而计算得到S-告依春的质量含量，从而实现对供试品中R-告依春和S-告依春这对对映异构体含量的分别测定；/n另外，所述标准曲线的制作包括如下步骤：/n①对照品溶液的制备/n分别精密称定R-告依春对照品和S-告依春对照品适量，用甲醇配制成浓度为0.05～0.6mg/mL的R-告依春对照品溶液和浓度为0.05～0.6mg/mL的S-告依春对照品溶液；按比例混合R-告依春对照品溶液和S-告依春对照品溶液，配制成不同含量的系列对照品溶液；/n②采用高效液相-紫外-圆二色谱法按步骤b)所述测试条件对步骤①配制的系列对照品溶液分别进行测定，并以R-告依春的质量百分含量为横坐标X，以圆二色谱峰面积ΔA与紫外色谱峰面积A的比值(g＝ΔA/A)为纵坐标Y，进行回归处理并绘制标准曲线。/n