[发明专利]一种细菌粘附细胞的快速检测方法及应用在审
申请号: | 201710978569.9 | 申请日: | 2017-10-19 |
公开(公告)号: | CN107523604A | 公开(公告)日: | 2017-12-29 |
发明(设计)人: | 巨向红;石琳;李思东;高振华;雍艳红 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N21/64 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人: | 刘瑶云,陈伟斌 |
地址: | 524088 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种细菌与细胞粘附的快速检测方法及其应用。所述快速检测方法其检测步骤如下S1.培养细胞,形成单层细胞;S2.培养细菌,并加入荧光染料CFSE标记细菌,标记30min~60min后加入终止剂终止反应;细胞与荧光染料标记后的细菌以数量比1300~400共培养2.5h~3h,再洗除未粘附的细菌;然后检测细胞的荧光强度,并计算粘附率;其中,细菌为可粘附但不入侵动物细胞的细菌,细胞为能贴壁生长的动物细胞。本发明所述的快速检测方法适用于细菌对宿主细胞粘附率的检测,在体外粘附试验模型的基础上,采用CFSE荧光染料标记细菌,通过检测细胞的荧光强度,即可得知细胞上细菌的粘附率。本方法的检测过程简单、快速,还可实时观察细菌与细胞的粘附状态。 | ||
搜索关键词: | 一种 细菌 粘附 细胞 快速 检测 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种细菌粘附细胞的快速检测方法,其特征在于,其检测步骤如下:S1. 培养细胞,形成单层细胞;S2. 培养细菌,并加入荧光染料CFSE标记细菌,标记30min~60min后加入终止剂终止反应;S3. 细胞与荧光染料标记后的细菌以数量比1:300~400共培养2.5h~3.5h,再洗除未粘附的细菌;然后检测细胞的荧光强度,并计算粘附率;其中,细菌为可粘附但不入侵动物细胞的细菌,细胞为能贴壁生长的动物细胞。
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