[发明专利]一种基于单链接头的下一代测序文库的构建方法及其应用有效
| 申请号： | 201710978737.4 | 申请日： | 2017-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN107586835B | 公开（公告）日： | 2020-11-03 |
| 发明（设计）人： | 王进科;武剑 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 孙斌 |
| 地址： | 210096*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于单链接头的下一代测序文库的构建方法及其应用，该方法包括以下步骤(1)将双链DNA片段或RNA/DNA杂合体片段变性，使其成为单链DNA；(2)在单链DNA的3′端连接一种单链接头；(3)对连接单链接头的单链DNA用DNA聚合酶延伸，使其成为双链DNA；(4)向双链DNA的另一端连接T接头或者Tn5标签接头；(5)通过PCR扩增两端连接接头的双链DNA，使其成为下一代测序技术可测序的DNA文库。本发明的方法不仅可用于下一代测序文库的构建，测定DNA序列，还可以鉴定染色质开放区、基因表达检测、微量核酸扩增等，是一种在核酸检测分析领域具有多种功能和广泛应用价值的新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 链接 下一代 序文 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种基于单链接头的下一代测序文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将双链DNA片段或RNA/DNA杂合体片段变性，使其成为单链DNA；(2)在单链DNA的3′端连接一种单链接头；(3)对连接单链接头的单链DNA用DNA聚合酶延伸，使其成为双链DNA；(4)向双链DNA的无单链接头的一端连接T接头或者Tn5标签接头；(5)通过PCR扩增两端连接接头的双链DNA，使其成为下一代测序可测序的DNA文库。
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