[发明专利]检测体外细胞增殖用载体及体外细胞增殖动态检测方法有效
| 申请号： | 201710983979.2 | 申请日： | 2017-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN107916270B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 聂勇战;窦建华;唐光波;杨美超;张慧霞 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/867;C12N15/66;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 史玫 |
| 地址： | 710032 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及检测体外细胞增殖用载体及体外细胞增殖动态检测方法。动态检测体外细胞增殖用载体，其特征在于，载体包括：依次连接的PLKO.1序列、CMV序列、eGFP序列、IRES序列和Puro序列。本发明构建的稳转细胞株，与同类细胞株相比，荧光亮度强、光稳定性好、背景信号低，且对细胞的生理无显著性影响。所述检测方法包括：用本发明的载体、psPAX2载体和PMD2.G载体三载体包装慢病毒；用步骤一得到的慢病毒转染目标细胞，嘌呤霉素筛选、流式细胞术分选，得到稳转细胞株；选择合适的细胞数量加入细胞培养板中，待细胞贴壁后，高内涵细胞成像系统采集图像；处理数据，并绘制细胞增殖曲线。本发明自动化程度高，误差小，重复性好，灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 体外 细胞 增殖 载体 动态 方法 | ||
【主权项】：
一种动态检测体外细胞增殖用载体，其特征在于，载体包括：PLKO.1序列、CMV序列、eGFP序列、IRES序列和Puro序列；所述PLKO.1序列、CMV序列、eGFP序列、IRES序列和Puro序列依次连接。
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