[发明专利]猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201710984675.8 | 申请日： | 2017-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN107557497A | 公开（公告）日： | 2018-01-09 |
| 发明（设计）人： | 刘新生;张永光;王永录;方玉珍;周鹏;肖帅 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 席勇 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法，试剂盒包括特异性引物和探针，引物序列如下上游引物5'‑ACGTCGTAAGACCCAGCATC‑3'；下游引物5'‑CCCACCTGAAAGTTGCTCTC‑3'；探针的序列为5'‑FAM‑GTATGGCTGATCCTCGCATCATGGC‑BHQ1‑3'；扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段648bp，本发明建立的TaqMan实时荧光定量PCR对PDCoV的最低检测限度为26.6copies/μL，而对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及口蹄疫病毒的检测结果均为阴性；本发明检测PDCoV的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、批间和批内重复性好。利用本发明对194份临床猪粪便样品进行检测，结果显示PDCoV阳性率为22.1％，高出常规RT‑PCR对该临床猪粪便样品检测的阳性率11.9％近1倍。 | ||
| 搜索关键词： | 猪德尔塔 冠状病毒 taqman 荧光 定量 pcr 试剂盒 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含引物和探针；所述引物的序列为：上游引物：5'‑ACGTCGTAAGACCCAGCATC‑3'；下游引物：5'‑CCCACCTGAAAGTTGCTCTC‑3'；所述探针的序列为：5'‑FAM‑GTATGGCTGATCCTCGCATCATGGC‑BHQ1‑3'；扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段648bp。
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