[发明专利]多肽加热固相合成方法

摘要

本发明涉及多肽合成技术领域，具体涉及一种多肽加热固相合成方法。多肽加热固相合成中，所有反应加热到恒温温度下进行。本方法与传统多肽固相合成方法相比，大大缩短了反应时间，提高了反应速率；与多肽微波固相合成方法相比，能够减少副反应的发生，提高长链多肽的反应收率。

主权项

一种多肽加热固相合成方法，包括如下步骤：(1)加热缩合氨基酸：向反应器中加入多肽树脂，Fmoc保护的氨基酸、缩合剂和溶剂，加热至反应温度，反应时间为10‑30min,反应结束后，在反应温度下用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤树脂3次，每次洗脱时间为20‑40s；(2)加热脱除Fmoc：加入脱保护剂20％的哌啶/N,N‑二甲基甲酰胺溶液，加热至反应温度，反应时间2‑5min,反应结束后，在反应温度下用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤树脂1次、氯仿洗涤树脂1次，按照上述洗涤顺序，重复洗涤树脂5‑7次,每次30‑40s；(3)加热缩合氨基酸：将下一个Fmoc保护的氨基酸溶液、缩合剂和溶剂加入装有步骤(2)中脱除Fmoc的氨基酸树脂复合物的反应器中，加热至反应温度，反应时间为10‑30min，反应结束后，用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤树脂3次，每次洗脱时间为20‑40s；(4)加热脱除Fmoc：加入脱保护剂20％的哌啶/N,N‑二甲基甲酰胺溶液，加热至反应温度，反应时间2‑5min,反应结束后，在反应温度下用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤树脂1次，然后用氯仿洗涤树脂1次，按照上述洗涤顺序，重复洗涤树脂5‑7次,每次30‑40s；(5)按照氨基酸从羧基端到氨基端的顺序，更换氨基酸，重复加热缩合氨基酸和加热脱保护基的反应，合成需要的多肽；(6)多肽粗品的制备：将步骤(5)洗涤后得到的保护肽‑树脂进行切肽反应，将切肽反应得到的反应产物过滤，从滤液中分离得到粗品肽；所述步骤(1)‑步骤(4)的反应温度为恒温温度。