[发明专利]一种双孢蘑菇遗传转化的方法在审
| 申请号： | 201710997662.4 | 申请日： | 2017-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN107916273A | 公开（公告）日： | 2018-04-17 |
| 发明（设计）人： | 刘建雨;尚晓冬;宋春艳;谭琦;徐珍;李巧珍;张丹;王瑞娟;于海龙;章炉军;张美彦;杨慧;李玉;周峰;姜宁 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N1/14 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人： | 齐云 |
| 地址： | 201100 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双孢蘑菇遗传转化的方法，涉及双孢蘑菇分子遗传转化技术领域。本发明公开的方法包括将双孢蘑菇液体菌丝接种至米粒培养基中，置于20‑25℃条件下进行预培养，培养至米粒表面长出双孢蘑菇菌丝；其中，预培养期间每天摇匀米粒培养基。该方法以米粒作为双孢蘑菇菌丝生长的附着基质，在预培养期间和共培养期间每天摇匀培养基质，使菌丝在米粒上均匀生长，且通过摇动时产生的撞击力能使附着在米粒上的菌丝随机产生伤口，更利于农杆菌进行侵染，提高转化率。与现有的遗传转化方法相比，本发明的方法操作方便，转化效率高，转化子易分离，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蘑菇 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种双孢蘑菇遗传转化的方法，其特征在于，其包括：步骤(a)：将双孢蘑菇液体菌丝接种至米粒培养基中，置于20‑25℃条件下进行预培养，培养至米粒表面长出双孢蘑菇菌丝；预培养期间每天摇匀米粒培养基；步骤(b)：将长有双孢蘑菇菌丝的米粒与诱导培养基混合，经超声处理和浸泡处理后，弃上清液，取沉淀下的米粒；步骤(c)：将步骤(b)得到的米粒与含有目的基因的农杆菌侵染液混合，经超声处理和静置侵染后，吸掉多余的农杆菌菌液，置于20～25℃条件下进行共培养；共培养期间每天摇匀米粒；步骤(d)：共培养结束后，挑取单颗米粒转入筛选培养基，置于20～25℃条件下进行筛选培养。
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