[发明专利]一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法

摘要

本发明属于DNA传感器技术领域，具体涉及一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法。本发明只通过“混合‑检测”步骤的检测Pb2+，具有非常好的灵敏度和选择性；G‑四链体DNA相比于金属离子辅助酶和RNA裂解脱氧核糖核酸酶来说更加稳定，不需要复杂的制备过程；相比于利用各种剪切酶的方案来说就更加的经济、便捷，而且作为荧光信号指示单元的PPIX很廉价并且具有非常有效的荧光特性，这些免标记的特点从根本上降低了检测的成本。

主权项

一种基于G‑四链体的DNA传感器对Pb2+浓度的测试方法，其特征在于包括以下步骤：①配制含有探针DNA的混合溶液，有探针DNA的混合溶液包括50mM pH 6.0的Tris‑HCl缓冲溶液，50mM KCl，10mM NaCl，0.5μM探针DNA，0~2000nM Pb2+；置于95℃的水浴中加热10分钟，之后冷却至室温；所述探针DNA的序列如SEQ ID NO:1 所示； ②向步骤①处理后不同Pb2+浓度下的含有探针DNA的混合溶液中加入等体积0.5μM的PPIX溶液，在暗处反应1h，最后用微量荧光比色皿在荧光光度计中测得其荧光光谱，激发波长设定为410nm，扫描范围为550nm‑750nm，测定在632nm处的荧光强度值；PPIX的结构式如下：；③绘出不同浓度Pb2+下荧光强度值的标准工作曲线； ④将配制的待测Pb2+浓度的含有探针DNA的混合溶液置于95℃的水浴中加热10分钟，之后冷却至室温，加入等体积0.5μM的PPIX溶液，在暗处反应1h，最后用微量荧光比色皿在荧光光度计中测得其荧光光谱，激发波长设定为410nm，扫描范围为550nm‑750nm，测定在632nm处的荧光强度值；根据步骤③的标准工作曲线，即可得出待测溶液的Pb2+浓度值。