[发明专利]一种鱼类传染性造血器官坏死病病毒的培养方法在审
| 申请号： | 201711044773.X | 申请日： | 2017-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN107937353A | 公开（公告）日： | 2018-04-20 |
| 发明（设计）人： | 任政华;卢中正;尹顺义;伍活镰;蒋东阳;赵辉 | 申请（专利权）人： | 广州齐志生物工程设备有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N5/073;C12N5/02;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州胜沃园专利代理有限公司44416 | 代理人： | 徐翔 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物制品技术领域，涉及一种鱼类传染性造血器官坏死病病毒培养方法。本发明利用微载体悬浮培养，实现了鱼类传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)病毒感染鲑鱼胚胎细胞(CHSE)在含有微载体的生物反应器中大规模培养，从而获得高滴度的IHNV病毒液，适用于鱼传染性造血器官坏死病病毒繁殖及灭活疫苗制备。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鱼类 传染性 造血 器官 坏死 病毒 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种鱼类传染性造血器官坏死病病毒悬浮培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.取长成单层的CHSE细胞，经胰酶消化后用细胞培养液中和，振摇分散细胞，调整细胞浓度；按4×108cells/mL的量转接种到含微载体的生物反应器中进行培养，培养条件为：培养温度16‑20℃，5％CO2，pH值在7.0‑7.5之间，葡萄糖含量不低于330mg/dL，溶氧为40％‑60％，搅拌速度为40‑60rpm；S2.待步骤S1中细胞密度达到2×106cells/mL细胞时，按体积比1：1000的比例接种含IHNV病毒毒种，并加入细胞生长液，每隔5分钟进行搅拌，16‑20℃孵育15‑45分钟，然后设置反应器参数：培养温度为16‑20℃，5％CO2，维持pH值在7.0‑7.5之间，葡萄糖含量不低于450mg/dL，溶氧为40％‑60％和搅拌速度30‑50rpm，进行持续培养。
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