[发明专利]一种分离纯化他克莫司的方法

摘要

本发明提供了一种分离纯化他克莫司的方法，本发明采用两套中压层析色谱设备，使用低色谱纯度他克莫司发酵提取液作为原料，经过第一道层析色谱柱去除多糖、蛋白质等杂质；随后用旋转蒸发工艺除去提取用溶剂，再次溶解并进行第二道层析色谱柱分离出低浓度并含他克莫司的洗脱液，洗脱液经过多批合并，使用纳滤膜浓缩后得到高纯度并呈固态的他克莫司。通过本发明所揭示的一种分离纯化他克莫司的方法，可实现从含有他克莫司的发酵液中直接进行纯化操作，并显著地提高了他克莫司的纯度，并间接地提高了由他克莫司所制成的免疫制剂的药效。

主权项

一种分离纯化他克莫司的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备低色谱纯度他克莫司发酵提取液，使用0.45微米的微孔有机滤膜抽滤后，待用；(2)在第一套中压层析色谱设备中使用层析硅胶作为填料，使用丙酮和/或乙醇进行清洗和平衡；(3)将低色谱纯度他克莫司发酵提取液在第一套中压层析色谱设备中层析，使用有机溶剂进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液旋转蒸发，用有机溶剂溶解后再次使用0.45微米的微孔有机滤膜抽滤；(4)在第二套中压层析色谱设备中使用反向硅胶作为填料，待用；(5)使用至少含丙酮的有机溶剂清洗反向硅胶，并将步骤(3)中所得样液配置为适宜上样的溶液，上样后经过多段洗脱，得到洗脱液；(6)将步骤(5)中所得洗脱液多批合并，使用纳滤膜浓缩，并进行脱色处理；(7)将步骤(6)中所得浓缩液进行结晶，并烘干。