[发明专利]一种采用分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的含量的方法

摘要

本发明公开了一种分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的含量的方法，本研究利用产品中游离的左旋肉碱可与乙酰辅酶反应生成乙酰肉碱和游离的辅藤的原理，通过分光光度法检测游离的辅酶与显色液反应生成黄色物质的量，间接求出试样中左旋肉碱含量。实验结果表明：乙酰辅酶溶液的加入量为80μL，肉碱乙酰转移酶溶液的加入量为100μL反应时间为5分钟时，能够达到准确、经济、快捷的检测要求。

主权项

1.分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的含量的方法，其特征在试样经过水提取，用高氯酸沉淀蛋白质后过滤；滤液经碱皂化后使溶液中复合态的左旋肉碱游离出来；左旋肉碱与乙酰辅酶在肉碱乙酰转移酶的催化下反应，生成乙酰肉碱和游离的辅酶；游离的辅酶和硝基苯甲酸反应生成黄色物质，其颜色深浅与游离的辅酶含量成正比；因游离的辅酶与左旋肉碱是等摩尔反应关系，可间接求出试样中左旋肉碱含量；处理方法是称取混合均匀的试样，用温水溶解于100m容量瓶中，加入10mL13%高氯酸，混合均匀后静止20min后过滤；取滤液20mL，用4mol/L KOH溶液调PH为12.5‑13.0，置于40℃水浴60min；冷却后用13%高氯酸将PH调为7.0‑7.5；转入50mL容量瓶定容；混匀后置于4℃冰箱中过夜；取出放置室温，取上清液用0.45μm滤膜过滤后备用；在412nm波长下测得吸光度值，从值得的标准曲线中计算出左旋肉碱的含量。