[发明专利]一种结香的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种结香的组织培养方法，使得在短期内可以获得大量的优质结香种苗，满足市场的需要；所述方法分为无菌材料的获得及芽诱导培养、芽的增殖和生根；本发明以腋芽为外植体，应用组织培养的方法进行快速繁殖，培养基中添加了酵母提取物等营养因子，克服了结香常规扦插和分株繁殖周期长、繁殖系数低、易感染和传播病毒等缺点；用该方法生产出来的组培苗具有病毒少、遗传性稳定等优点。

主权项

一种结香组织培养方法，其特征在于所述方法按如下步骤进行：(1)无菌材料的获得及诱导培养：切取长势良好、无病虫害的结香幼嫩的腋芽，用自来水冲洗30～60min，然后在体积浓度为1％洗洁精的水溶液中振摇2～5min，用无菌水冲净；在超净工作台上用体积浓度70～75％乙醇水溶液浸泡30～60s，然后用混合消毒液浸泡10～20min，再用无菌水冲洗3～5遍；在灭菌的滤纸上吸干水分，剥取0.3～0.6mm的腋芽尖，然后将腋芽尖接种到装丛生芽诱导培养基的培养瓶中，盖上瓶盖并用封口膜封住瓶口，置于培养箱中，在24～26℃，光照1500～2500lx条件下培养15～25天；所述混合消毒液为体积比1：200的吐温20和84消毒液的混合液；所述丛生芽诱导培养基为添加IAA0.1～0.5mg/L、6‑BA0.5～2.0mg/L、NAA 0.05～0.5mg/L和PVP 20～80mg/L的MS基本培养基；(2)芽的增殖：观察步骤(1)所述24～26℃，光照1500～2500lx条件下培养5～15天后，切口部位出现绿色突起，20～40天后出现丛生芽，再培养10～20天，当丛生芽长到2～4cm时，将丛生芽切下转接到芽增殖培养基中，在24～26℃，光照1500～2500lx条件下进行增殖培养，获得丛生苗；所述芽增殖培养基为添加IAA0.1～0.5mg/L、6‑BA0.5～2.0mg/L、NAA 0.05～0.5mg/L、酵母浸出物200～600mg/L和PVP20～80mg/L的MS基本培养基；(3)生根培养：将分化的丛生苗从基部切下，插入生根培养基中培养至芽生根，所述的生根培养基为改良的1/2MS培养基中加入0.05mg/L～0.2mg/L的NAA,20mg/L～50mg/L的PVP。