[发明专利]一种石斛多倍体植株的培育方法

摘要

本发明公开了一种石斛多倍体植株的培育方法，涉及石斛多倍体技术领域。本发明通过将消毒后的石斛种子在秋水仙素中发生纺锤体的破裂，于MS培养液中培养后再置于萌发培养基中培养成幼苗，然后转接到增值培养基中稳定扩繁，得到性状稳定的多倍体，培养基中培养得到多倍体植株幼苗。本发明的石斛多倍体植株培育方法操作简单，可以快速实现石斛新品种的选育，缩短了育种周期，性状优良，有效提高了培育速率。

主权项

1.一种石斛多倍体植株的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将消毒后的石斛种子抖入秋水仙素溶液中，黑暗条件下培养6～10d后，离心、洗涤去除秋水仙素；所述秋水仙素溶液浓度为0.1～0.4％，pH为5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；(2)将秋水仙素处理过的石斛种子转接到石斛种子萌发培养基中，先于培养箱中黑暗条件下培养5～8d，再移至培养室，培养温度23～28℃，光照度2000～2800lx，光照12h/d，培养三个月得到多倍体石斛幼苗；所述石斛种子萌发培养基组成如下：1-萘乙酸0.2～0.5mg/L，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；(3)将上述培养得到的石斛幼苗，挑选出茎变粗、叶片加厚、叶色加深的植株，转接到石斛增殖培养基中进行稳定扩繁，选取2～3代性状稳定的植株进行多倍体的鉴定；所述石斛增殖培养基组成如下：6-苄氨基嘌呤1.0～2.0mg/L，1-萘乙酸0.1～0.5mg/L，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液；(4)鉴定为多倍体的植株转接到生根壮苗培养基中进行培养，即获得石斛多倍体植株的幼苗；所述生根壮苗培养基组成如下：1-萘乙酸0.5～0.6mg/L，香蕉汁5～10％，pH5.8～6.2，溶剂为1/2MS或MS培养液。