[发明专利]一种天花粉的组织培养快繁技术

摘要

本发明公开了一种天花粉的组织培养快繁技术，天花粉为葫芦科植物，秋、冬两季采挖，以秋季采收者为佳。挖取根部，洗净，除去须根，刮去外皮，晒干。根呈不规则网柱形、纺锤形或瓣块状。表面黄白色或淡黄棕色，有纵皱纹，细根痕及凹陷的横向皮孔。气无，味微苦。以块大、色白、粉性足、质坚、细腻、筋脉少者为佳。含天花粉蛋白，还含有淀粉、皂苷、谷氨酸、精氨酸。以天花粉带腋芽茎段为外植体建立了天花粉离体快繁体系，为解决天花粉规模化生产奠定基础。本发明以带腋芽茎段为外植体，通过丛生芽诱导、增殖培养、根苗诱导以及试管苗驯化移栽等过程实现了天花粉的组织培养快速繁殖，为天花粉的产业化发展提供技术支持。

主权项

一种天花粉的组织培养快繁技术，其特征在于包括以下工艺步骤：（1）外植体的处理：选取健壮天花粉植株上切取带腋芽的茎段作为外植体，剪去叶片，切成7.0长的带有4个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗4.5h，再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗4.5h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒34s后用无菌水洗7次，再用0.1%升汞溶液消毒13min，用无菌水冲洗9次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；（2）丛生芽导：将步骤（1）处理后的带腋芽茎段切成4cm小段并接种到诱导培养基上,先在25℃条件下全暗培养7天，然后每天光照14小时，光照强度为3400lx，直至诱导形成丛生芽；（3）增殖培养：将步骤（2）培养获得的嫩芽长至约4cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25℃条件下全暗培养6天，然后每天光照19小时，光照强度为5200lx，置于培养温度为25℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，以得到更多的丛生芽；（4）生根培养：当步骤（2）或（3）的丛生芽长至5cm高时，将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在25℃条件下全暗培养6天，然后置于每天光照19小时，光照强度为3400lx，培养温度为25℃的条件下培养直至长出根；（5）试管苗移栽：当小苗长出的新根系长达5cm左右时，并且长出侧根，苗高7cm以上时，将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗9天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入经灭菌过的蛭石中。