[发明专利]一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达及纯化方法在审
申请号: | 201711137213.9 | 申请日: | 2017-11-16 |
公开(公告)号: | CN108004261A | 公开(公告)日: | 2018-05-08 |
发明(设计)人: | 薛正莲;朱昊;王洲;刘艳;陈阿娜;杨蒙;甘玉飞 | 申请(专利权)人: | 安徽工程大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/00;C07K1/14 |
代理公司: | 北京东方灵盾知识产权代理有限公司 11506 | 代理人: | 苏向银 |
地址: | 24100*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法,将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽,得到截短辅助蛋白,然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株,将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术,将plaS基因N端截短35AA,并成功构建了BL21/dSP28表达菌株,使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化,获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化,确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达,减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作,纯化方法提高了蛋白得率,使纯化过程更为简便。 | ||
搜索关键词: | 一种 磷脂酶 a1 辅助 蛋白 plas 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1.一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法,其特征在于:将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽,得到截短辅助蛋白,然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株,将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。
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