[发明专利]一种检测叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的方法

摘要

本发明提供了一种检测叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的方法，先制备SiO₂‑FO包被抗原和免疫原，然后制备抗SiO₂‑FO多克隆抗体；再将制备的BODIPY‑PFNPs与抗SiO₂‑FO抗体的交联；以SiO₂‑FO‑OVA为包被抗原，以BODIPY‑PFNPs标记的抗SiO₂‑FO抗体作为一抗，建立直接竞争荧光免疫分析法定量检测SiO₂‑FO；以SiO₂‑FO标准品浓度的对数为横坐标，荧光强度值为纵坐标绘制标准曲线，从而定量检测出SiO₂‑FO的浓度。与现有技术相比，本发明具有操作简单、灵敏度高、特异性强、可实现高通量检测等特点。

主权项

1.一种检测叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a、SiO₂‑FO包被抗原和免疫原的制备；b、抗SiO₂‑FO多克隆抗体的制备；c、BODIPY‑PFNPs的制备；d、BODIPY‑PFNPs与抗SiO₂‑FO抗体的交联；e、以SiO₂‑FO‑OVA为包被抗原，以BODIPY‑PFNPs标记的抗SiO₂‑FO抗体作为一抗，建立直接竞争荧光免疫分析法定量检测SiO₂‑FO；以SiO₂‑FO标准品浓度的对数为横坐标，荧光强度值为纵坐标绘制标准曲线，从而定量检测出SiO₂‑FO的浓度；所述步骤c采用沉淀聚合法合成BODIPY‑PFNPs，具体包括以下步骤：c‑1、将氟化硼二吡咯BODIPY荧光染料与丙烯酰胺AM溶于乙腈中，充分混匀；c‑2、加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯EDGMA，超声混匀；c‑3、再加入引发剂偶氮二异丁腈AIBN，磁力搅拌混匀；c‑4、通氮气，然后密封，置于油浴锅中，50～65℃条件下恒温聚合；c‑5、聚合完成后，离心分离，先用无水甲醇清洗2次，再用乙腈洗至上清液无荧光，冷冻干燥即得包裹BODIPY的新型聚合物纳米粒子(BODIPY‑PFNPs)，4℃保存。