[发明专利]一种从微藻中提取生物表面活性剂的方法

摘要

本发明公开了一种从微藻中提取生物表面活性剂的方法，包括：浓缩液制备、发酵、酶液制备、配制，选取溢油现场采集筛选出的小球藻经培养后浓缩，将扩大培养后的小球藻进行发酵，以超声破碎仪破壁后提取酶液，将小球藻浓缩液与小球藻酶液混合后添加稳定剂即为生物表面活性剂。有益效果为：制备方法简单易行，成本低廉，安全环保，不添加新的污染物质；从微藻中提取的生物表面活性剂，其表面张力、乳化活力、黏度等乳化指标较为稳定，同时生物表面活性剂具有低毒、环保、作用条件温和、污染物降解彻底等优点，对石油的降解能力较强，其降解指数可以达到73.68‑91.56%，是一种安全高效的生物表面活性剂。

主权项

1.一种从微藻中提取生物表面活性剂的方法，包括以下步骤：浓缩液制备：取培养后的小球藻藻液1L，离心10-15分钟，去掉所得上清液，留沉淀；将沉淀用缓冲液重悬浮，重复离心3-4次；将离心出的所有藻液进行合并，并用缓冲液稀释，终体积为200-220mL，于0-4℃温度下储存备用；发酵：按照3.5-5.0%接种经培养后的小球藻，发酵72-96小时得发酵液；酶液制备：将发酵液在0-4℃、3500-5000r/min条件下离心10-15分钟，将沉淀用缓冲液重悬浮后重复离心2-3次，合并沉淀；将沉淀溶于缓冲后用超声破碎仪破碎细胞，离心后留上清液，沉淀部分用缓冲液进行重悬浮，重复离心3-5次合并上清液，低温浓缩至200-220mL后于0-4℃保存备用；配制：于3-4℃条件下，将小球藻浓缩液与小球藻酶液按1:0.5-3.0的体积混合，混合液密封后，置于装有冰水的三角瓶中，在20-22℃、200-220r/min条件下振荡混合10-13分钟，以5-6:1的体积添加稳定剂，即得生物表面活性剂。