[发明专利]一种利用免疫磁捕获快速检测阪崎克罗诺杆菌的方法

摘要

本发明公开了一种利用免疫磁捕获快速检测阪崎克罗诺杆菌的方法，属于食品安全快速检测技术领域。该方法是将阪崎克罗诺杆菌的单克隆抗体和羧基磁珠进行共价偶联获得免疫磁珠，然后利用获得的免疫磁珠对置于捕获体系中进行捕获，并利用LAMP方法进行扩增检测。本发明方法可以快速、高效的捕获并富集阪崎克罗诺杆菌，尤其是在纯培养物和乳制品中，改善了传统前增菌过程的弊端，大大缩短了增菌时间，耗时短，同时为各种病原体的检测提供了新的前处理方法。且LAMP方法具有操作简便，特异性强、灵敏度高等优点，为实现快速检测阪崎克罗诺杆菌领域提供了参考。

主权项

1.一种利用免疫磁捕获快速检测阪崎克罗诺杆菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)羧基磁珠的活化：将羧基磁珠与EDC溶液混合，获得活化的羧基磁珠；(2)抗体的偶联：将活化的的羧基磁珠与阪崎克罗诺杆菌的单克隆抗体溶液混合进行共价偶联，获得免疫磁珠；(3)菌体的捕获：将获得的免疫磁珠置于捕获体系中进行捕获；(4)利用试剂盒法提取细菌基因组DNA，得到提取物；(5)以提取物作为模板进行LAMP扩增，得到LAMP扩增产物；所述LAMP扩增反应的引物组如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示；(6)取LAMP扩增产物，点样于质量浓度为2％的琼脂糖凝胶中，以100V电压在1×TAE电泳缓冲液中电泳30min，然后在凝胶成像系统中成像，即完成检测，若产生LAMP特异性扩增条带，表明该待检物中含有阪崎克罗诺杆菌，若无LAMP特异性扩增条带，表明该待检物中不含有阪崎克罗诺杆菌。