[发明专利]一株高产葡萄糖氧化酶生产工艺在审
| 申请号： | 201711183906.1 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109825483A | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 韩国宝;梁爱民;张天航 | 申请（专利权）人： | 朝阳华星生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N1/16;C12R1/84 |
| 代理公司： | 锦州辽西专利事务所(普通合伙) 21225 | 代理人： | 王佳佳 |
| 地址： | 122300 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一株高产葡萄糖氧化酶生产工艺，将发酵毕赤酵母用麦芽汁琼脂培养基发酵培养，作为一级发酵种子液，接种到发酵培养基中进行一级种子培养，培养温度为28℃‑30℃，培时24h，作为二级培养种子液，接种液接种到发酵培养基中进行二级种子培养，发酵结束后，收集二级发酵种子液，接种至发酵罐中，进行诱导表达，发酵结束，收集罐内发酵液，在发酵液经过离心喷雾干燥，制得葡萄糖氧化酶粉末。以发酵毕赤酵母进行发酵制备葡萄糖氧化酶，经优化菌种活化条件，发酵工艺优化控制，确立了稳定的产业化发酵生产工艺，工艺合理，的葡萄糖氧化酶活力高，大大减少了葡萄糖氧化酶的生产成本，促进规模化工业生产。 | ||
| 搜索关键词： | 葡萄糖氧化酶 发酵 接种 发酵培养基 毕赤酵母 发酵液 生产工艺 麦芽汁琼脂培养基 二级培养种子液 二级发酵种子 二级种子培养 发酵生产工艺 离心喷雾干燥 一级发酵种子 一级种子培养 高产 发酵工艺 发酵培养 菌种活化 优化控制 诱导表达 产业化 规模化 接种液 制备 生产成本 优化 | ||
【主权项】：
1.一株高产葡萄糖氧化酶生产工艺，其特征是：具体步骤如下：(1)培养基组成麦芽汁琼脂培养基：麦芽汁1.0L，琼脂15.0g，pH自然；一级种子罐培养基：葡萄糖1.5％‑2.5％，蛋白胨1.5％‑2.5％，酵母粉1％‑1.5％；发酵培养基：葡萄糖5％，磷酸二氢铵5％，磷酸二氢钾0.5％，硫酸钾2.5％，硫酸镁1.8％，硫酸钙0.5％，氢氧化钾0.2％，微量元素L 0.6％，甲醇0.05％，消泡剂0.03％；(2)菌种培养将发酵毕赤酵母(Pichia fermentans)编号2.1838中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，用麦芽汁琼脂培养基在温度25℃‑28℃下，发酵培养24h，作为一级发酵种子液；(3)一级种子培养将一级发酵种子液接种到发酵培养基中进行一级种子培养，接种量为3％‑5％，培养温度为28℃‑30℃，风量为1:2vvm，转速160rpm，培时24h，作为二级培养种子液；(4)二级种子培养将二级种子接种液接种到发酵培养基中进行二级种子培养，接种量为3％‑5％，培养温度为28℃‑30℃，风量为1:2vvm，转速为160rpm‑180rpm，培养时间为48h，发酵结束后，收集二级发酵种子液；(5)发酵培养将二级发酵种子液接种至发酵罐中，进行发酵培养，接种量为3％‑5％，培养温度为28℃‑30℃，0‑40h溶氧＞40％，40h以后溶氧＞20％，进行诱导表达，培养时间为100h，发酵结束，收集罐内发酵液；(6)喷雾干燥在发酵液经过离心喷雾干燥，在170℃下喷雾干燥，制得葡萄糖氧化酶粉末。
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