[发明专利]一种小球藻多糖的制备方法

摘要

本发明涉及一种小球藻多糖的制备方法，其按以下步骤进行：破壁、膜过滤、洗脱、水冷冻干燥。本发明的小球藻多糖提取制备方法，所得提取物中小球藻多糖含量远高于常规方法，其他成分和杂质含量也较常规提取低。

主权项

1.一种小球藻多糖的制备方法，其按以下步骤进行：1) 准确称取小球藻粉末20 g溶于400 mL水中，在室温下不断搅拌溶胀4 h；2) 在47℃环境中向小球藻溶液中缓慢加入NaOH粉末至NaOH浓度达到4%，并不断搅拌；3) 在47℃环境中，超声‑碱液破壁25 min，调节pH至7，2000 rpm离心20 min，取上清液，4℃冷却后备用；4) 于4℃环境中，加入4倍体积于上清液的冰镇95%乙醇，持续搅拌1 min，静置5 h，2000 rpm离心20 min，去上清液，去除沉淀残余表面酒精，收集沉淀，用0.1 mol/L pH=6的PBS溶液溶解沉淀，4℃保存备用；5)加入复合风味蛋白酶，50℃环境中酶解5 h，期间每半小时调节pH为6；6) 将酶解液置于沸水中15 min，8000 rpm离心10 min，取上清液，于旋转蒸发仪中浓缩上清液，即为小球藻粗提溶液，4℃保存；7）制备的粗提取液用0.22 μm超滤膜除去大分子及杂质，以0.1 mol/L pH=6.8的PBS溶液为洗脱液，0.33 mL/min的速度进行洗脱，收集小球藻多糖，冷冻干燥即为纯化后的小球藻多糖。