[发明专利]建立含外源染色体的胚胎干细胞的方法有效
| 申请号： | 201711192326.9 | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN109837307B | 公开（公告）日： | 2023-09-19 |
| 发明（设计）人： | 杨辉 | 申请（专利权）人： | 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89;C12N5/10;C07K16/18 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 肖艳;徐迅 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种建立含外源染色体的胚胎干细胞的方法。具体地，本发明通过显微注射的方法将插入mCherry报告基因的单条染色体注射到小鼠受精卵中，从而产生含有外源染色体的小鼠胚胎干细胞(ESCs)。通过单染色体显微注射方法来直接转移修饰过的染色体从而来介导染色体工程的方法是一种非常有效的技术，并且可以促进含外源染色体的细胞的获得和染色体操作。 | ||
| 搜索关键词： | 建立 含外源 染色体 胚胎 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种体外建立含外源染色体的胚胎干细胞的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：(a)提供一供体细胞，将mCherry报告基因插入到所述供体细胞的各个染色体中，从而获得染色体中整合有mCherry报告基因的第一细胞系；(b)分离所述第一细胞系的各个染色体，从而获得单独的染色体；(c)将步骤(b)获得的单独的染色体注射到非人哺乳动物的受精卵中，从而获得包含外源染色体的受精卵；(d)将步骤(c)获得的受精卵体外培育形成囊胚，检测所述囊胚的mCherry荧光表达情况，从而获得表达mCherry荧光的囊胚；和(e)利用所述的表达mCherry荧光的囊胚，建立胚胎干细胞系，从而获得含外源染色体的胚胎干细胞。
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