[发明专利]一种可同时标记细胞核的封片剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种可同时标记细胞核的封片剂的制备方法，包含如下步骤1)配制1mol/L Trizma Base；2)配制1mol/L NaH2PO4·2H2O；3)配制Tris‑磷酸盐缓冲液；4)配制50%甘油；5)封片剂配制。本发明制备的可同时标记细胞核的封片剂，省去了染色和洗涤的步骤，能有效简化实验流程，节约时间成本，提高工作效率。该封片剂可用于冰冻切片、石蜡切片、细胞爬片和血液涂片等样本的细胞核标记及封片。该封片剂不仅可以用于荧光显微镜的观察，也可用于激光共聚焦显微镜的观察。

主权项

一种可同时标记细胞核的封片剂的制备方法，其特征是，包含如下步骤：1). 配制1mol/L Trizma Base：取12.11g Trizma Base溶于100ml去离子水，备用；2). 配制1mol/L NaH2PO4·2H2O：取15.62g NaH2PO4·2H2O溶于100ml去离子水，备用；3). 配制Tris‑磷酸盐缓冲液：取1mol/L Trizma Base 50ml，用1mol/L NaH2PO4·2H2O调节pH至7.6，备用；4). 配制50%甘油：取甘油100ml，加入100ml去离子水，充分混匀，高压灭菌，备用；5). 封片剂配制：a. 取上述配制好的Tris‑磷酸盐缓冲液5ml和75ml去离子水充分混合；b. 向步骤a制备的混合溶液中加入20g聚乙烯醇，充分搅拌混合，用保鲜膜密封，放置60℃水浴过夜；c. 取三氯叔丁醇100mg与50%甘油30ml充分搅拌混合；d. 取DAPI 0.1mg加入步骤c的溶液中，充分混匀；e. 将步骤d溶液缓慢加入步骤b溶液中，一边加一边混匀；f. 混合后的液体用保鲜膜密封，并用锡箔纸包裹避光，4℃保存，即成。