[发明专利]利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN-β启动子活性的方法有效
| 申请号： | 201711195597.X | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN108004270B | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 孙建和;刘云霞;程玉强;严亚贤 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66;C12Q1/66 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 庄文莉 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN‑β启动子活性的方法，包括以下步骤：A、构建含鸭IFN‑β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒；B、将含鸭IFN‑β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒与刺激物、内参质粒及脂质体预混后转染目标细胞；所述内参质粒为海参荧光素酶质粒；C、将转染后的目标细胞进行培养后裂解，检测荧光素酶活性，即得鸭IFN‑β启动子活性。该方法操作简单易行，通量高，且具有较高的可重复性和准确度，为研究鸭IFN‑β通路提供了有效的检测工具。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 荧光 报告 基因 检测 ifn 启动子 活性 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN-β启动子活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、构建含鸭IFN-β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒；B、将含鸭IFN-β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒与刺激物、内参质粒及脂质体预混后转染鸭胚成纤维细胞DEF,所述内参质粒为海参荧光素酶质粒；C、将转染后的DEF细胞进行培养后裂解，检测荧光素酶活性，即得鸭IFN-β启动子活性。
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