[发明专利]一种TCR敲除的靶向MAGE-A3的T细胞受体基因修饰T细胞及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201711197371.3 | 申请日： | 2017-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN109837248A | 公开（公告）日： | 2019-06-04 |
| 发明（设计）人： | 张长风;吴咏东 | 申请（专利权）人： | 深圳宾德生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;熊永强 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞的制备方法，包括：通过敲除T淋巴细胞上的TCR基因，并制备靶向MAGE‑A3的T细胞受体，得到TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞。本发明所述制备方法制备的TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞可以有效防止T细胞中存在的内源性和外源性的TCR的α链和β链间的错配，避免了自身免疫反应，保持高效且特异性的杀伤MAGE‑A3阳性肿瘤细胞的性能。本发明还提供了TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 敲除 修饰 制备 制备方法和应用 阳性肿瘤细胞 自身免疫反应 内源性 外源性 错配 杀伤 应用 | ||
【主权项】：
1.一种TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞的制备方法，其特征在于，包括：(1)提供CD3阳性T淋巴细胞，敲除所述CD3阳性T淋巴细胞的TCR基因，得到TCR敲除的CD3阳性T淋巴细胞；(2)提供靶向MAGE‑A3的T细胞受体TCR‑MAGE‑A3的编码基因，包括从5’端到3’端顺次连接的α链的编码基因、2A肽的编码基因和β链的编码基因，其中，所述α链的编码基因包括编码如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的核苷酸序列，所述β链的编码基因包括编码如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的核苷酸序列，所述2A肽的编码基因包括编码如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的核苷酸序列；(3)将所述TCR‑MAGE‑A3的编码基因插入到pLenti载体中，得到pLenti‑TCR‑MAGE‑A3重组质粒；(4)包装所述pLenti‑TCR‑MAGE‑A3重组质粒，得到重组慢病毒；(5)将所述重组慢病毒转染所述TCR敲除的CD3阳性T淋巴细胞，得到TCR敲除的靶向MAGE‑A3的T细胞受体基因修饰T细胞。
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