[发明专利]一种基于液晶生物传感器检测天蚕素B的方法

摘要

本发明提供了一种基于液晶生物传感器检测天蚕素B的方法，将N,N‑二甲基‑N‑十八烷基(3‑[三甲氧基硅烷]丙基)氯化铵/三乙氧基丁醛硅烷(DMOAP/TEA)混合自组装修饰玻片表面，诱导液晶分子取向；采用TEA中的醛基将天蚕素B固定于自组装膜修饰的基底表面，天蚕素B抗体与固定于玻片表面的天蚕素B特异性结合后，会扰乱液晶分子的取向，导致光学信号的颜色和亮度发生变化，以此实现对天蚕素B的检测。本发明在检测天蚕素B时，结合液晶生物传感器的优点，从而具有灵敏度高、特异性好、非标记和操作简单等特点。

主权项

一种基于液晶生物传感器检测天蚕素B的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)玻片的预处理将玻片切割成所需大小，用新配制的Piranha溶液于80℃充分浸泡，再分别用乙醇和去离子水清洗干净，经N2吹干，干燥，防尘备用；2)玻片的组装2‑1)上玻片的DMOAP溶液组装：将经过步骤1)预处理的玻片浸入DMOAP水溶液中，充分浸泡后，用超纯水冲洗干净，N2吹干，干燥，防尘备用；2‑2)下玻片的TEA和DMOAP混合溶液组装：将经过步骤1)预处理的玻片浸入50℃的TEA:DMOAP体积比为1‑5:1的醋酸‑醋酸钠溶液中，充分浸泡后，用超纯水冲洗干净，N2吹干，干燥，防尘备用；3)天蚕素B的固定取适量的CB溶液滴加至下玻片表面，于37℃温育2.5h，取出后分别用PBS缓冲液和超纯水冲洗，除去未固定的CB分子，N2吹干，冷冻保存；4)天蚕素B抗原抗体竞争免疫反应将一定浓度的天蚕素B抗体溶液与不同浓度的天蚕素B溶液37℃恒温混匀10min后滴加至固定有抗原的玻片上，于37℃温育1.5h，抗原抗体即可实现免疫竞争反应；分别用PBS缓冲液和超纯水冲洗，N2吹干备用；5)液晶池的制作液晶池由上玻片和下玻片面对面组装而成，玻片之间用Mylar聚酯片隔开，Mylar聚酯片中间开凸型空腔，除开孔方向外，其它三边边缘用小夹子固定；先将液晶5CB加热到40℃左右使其呈各向同性的液态，然后将其从Mylar聚酯片开孔处注入并通过毛细管作用力布满整个空腔，自然冷却到28℃左右观察。