[发明专利]交替假单胞菌生态菌剂的制备

摘要

本发明涉及一种微生态制剂，特别涉及一种交替假单胞菌生态菌剂的制备及在海水养殖上的应用。首先从健康的对虾体表分离纯化出对海水养殖动物常见病原菌具有拮抗作用的有益菌，并进行致病菌的拮抗性检验再进行筛选获得菌株和发酵以规模生产制成菌剂。该菌剂可直接施用于水体或拌食投喂，具有无污染的环保特点，可改善养殖水环境的微生物群落的结构，减少或避免兽药污染和残留，降低养殖成本，提高养殖动物的成活率。

主权项

一种交替假单胞菌生态菌剂的制备方法，其特征是首先分离纯化出交替假单胞菌落，即捕获50～100g健康的对虾个体，迅速将其放置于盛有灭菌海水的无菌容器中进行如下操作，用无菌海水冲洗其表面3次，每次不超过30秒，然后再将其放置在无菌海水中，剧烈震荡2～5分钟，用无菌器械将养殖动物取出后，从中吸取50～100ml海水无菌操作涂布在以灭菌海水配置的灭菌的2216E固体培养基上，在25～30℃进行培养48小时，选取其中呈桔黄色的菌落，通过革兰氏染色和鞭毛染色，以选其中具有革兰氏阴性和极生单鞭毛的直杆状特征的菌落，然后再进行对常见海水养殖动物致病菌的拮抗性检验，再将纯化后的具有拮抗作用的菌株进行筛选，将获取的交替假单胞菌进行细菌的培养和发酵，即以2216E溶液进行0倍～6倍稀释后的液体培养液均可作为发酵液，用1M盐酸和1M的NaOH调节pH在7.2～8.5之间，发酵条件：接种量以发酵体积的10％～20％，接种后细菌浓度106～107Cfu/ml为宜，在温度25～30℃以100～260rpm频率震动培养24～36小时，将发酵后的菌液通过4～10℃下以3000g～10000g的离心力进行离心，除去培养液，收集菌体，用灭菌海水进行稀释成不同浓度待使用。