[发明专利]超声萃取‑固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中六类24种抗生素的方法

摘要

本发明公开了一种超声萃取‑固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中六类24种抗生素的方法。该方法为(1)提前加入内标物指示回收率，超声萃取；(2)固相萃取富集净化目标抗生素；(3)液质联用检测24种抗生素的含量。本发明可一次性同时检出畜禽粪便中六类24种抗生素的残留情况，检测过程耗时少，检测高精密度、高灵敏度、高稳定性、高选择性和检出限低。提取溶剂的优化能有效减少抗生素与粪便中金属离子的螯合，使目标抗生素从样品中分离，提高回收率，且操作简便，富集倍数高，重现性好。将指示回收率的内标物加在整个前处理过程前，能够很好地表示前处理过程中目标物质的损失，使最终结果更加真实可靠。

主权项

一种超声萃取‑固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中六类24种抗生素的方法，其特征在于，按以下步骤进行：(1)抗生素类物质的提取：超声萃取称取经冷冻干燥、粉碎、过筛后的畜禽粪便，加入指示回收率的内标物，再加入提取溶剂，经超声萃取、离心后收集上清液即提取液，多次提取，合并提取液；用超纯水稀释合并后的提取液，过滤后待用；(2)固相萃取前处理，即富集净化过程依次用甲醇和等体积的超纯水活化固相萃取小柱，将经步骤(1)处理过的样品过柱即富集，控制水样流速；富集完成后依次用超纯水和等体积的低浓度甲醇淋洗，并在真空下干燥固相萃取柱；之后，再用甲醇洗脱，甲醇洗脱后用氮气吹干收集的洗脱液，得到残渣；将残渣用一定浓度的甲醇重新溶解，定容，经超声、过滤后转移至进样瓶中，待测；(3)液相色谱串联质谱法测定粪便中六类24种抗生素的含量采用内标法，在液相色谱‑串联质谱仪上，定量检测进样瓶内的畜禽粪便样品中六类24种抗生素的含量；所述的六类24种抗生素是指磺胺类、四环素类、氟喹诺酮类、大环内酯类、酰胺醇类和青霉素类这六类的24种抗生素；24种抗生素分别为磺胺甲恶唑、磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲异恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、阿奇霉素、克拉霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、环丙沙星盐酸盐、氟罗沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、盐酸土霉素、金霉素盐酸盐、阿莫西林三水合物、青霉素G甲盐、甲砜霉素、氟甲砜霉素、氯霉素、盐酸氯苯胍。