[发明专利]一种以红根草花序为外植体诱导其不定芽的方法

摘要

本发明公开了一种以红根草花序为外植体诱导其不定芽的方法，通过选取红根草花葶抽生的未开放幼嫩花序作为外植体，用软毛刷沾取洗衣粉水溶液轻轻刷洗表面灰尘，在混合消毒液中进行消毒预处理后；在转入超净台中，先用75%酒精进行表面消毒，再将外植体浸泡于升汞和吐温混合液中消毒，最后用无菌水冲洗3‑4次，获得无菌的幼嫩花序，接种于初代培养基中进行不定芽的诱导。本发明方法解决了红根草组织培养中外植体采集时间短、量少、消毒困难和褐变率高的问题，可保证获得充足的外植体，并可有效降低红根草外植体的污染率，提高外植体的存活率。

主权项

1.一种以红根草花序为外植体诱导其不定芽的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）外植体准备：在晴天上午11点前后，选取生长健壮的红根草花葶抽生的未开放幼嫩花序，用解剖刀切取长约0.5~1.0cm作为外植体；（2）外植体的预处理：用软毛刷沾取洗衣粉水溶液轻轻刷洗外植体表面，流水冲洗至无泡沫后，置于多菌灵和维生素C配制的混合溶液中浸泡25~30 min，自来水冲洗30 min，吸干表面水分，得到预处理后的外植体；（3）外植体的消毒处理和接种：在超净台中，将预处理好的外植体置于75%酒精中浸泡10s，再移入升汞+吐温-80的混合消毒液中浸泡7~11 min，浸泡过程中不时轻轻摇晃瓶子，使外植体与消毒液充分接触，之后无菌水漂洗3-4次，用无菌吸水纸吸干表面水分，接种至MS+TDZ 0.5mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L中进行红根草不定芽的诱导培养。