[发明专利]一种金边土鳖快速鉴别方法有效
| 申请号： | 201711267988.8 | 申请日： | 2017-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN107828900B | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 孙冬梅;胥爱丽;毕晓黎;陈昭;李素梅;李养学;江洁怡;陈伟韬;张靖年 | 申请（专利权）人： | 广东省第二中医院（广东省中医药工程技术研究院） |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 东莞市兴邦知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 44389 | 代理人： | 蔡喜玉 |
| 地址： | 510095*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种金边土鳖快速鉴别方法，通过针对金边土鳖的特征引物的聚合酶链式反应，对金边土鳖进行快速鉴别。利用PCR法对金边土鳖的DNA序列进行分析，找出其中的特异性位点，从物种的分子水平上对金边土鳖进行鉴定，能够准确、快速、有效地区分金边土鳖及其同属动物的混淆品。本发明金边土鳖快速鉴别方法能够简单、准确、直接地鉴别金边土鳖，只需微量的用量即可检测，并具有灵敏度高，稳定性好，特异性强的特点，用于制药过程中金边土鳖药材快速质量控制。 | ||
| 搜索关键词： | 土鳖 快速鉴别 聚合酶链式反应 快速质量控制 特异性位点 分子水平 特异性强 特征引物 灵敏度 有效地 制药 混淆 鉴别 物种 药材 检测 分析 | ||
【主权项】：
1.一种金边土鳖快速鉴别方法，其特征在于：通过针对金边土鳖的特征引物的聚合酶链式反应，对金边土鳖进行快速鉴别；其包括以下步骤：步骤一、将收集的各批供试药材分别取总DNA；步骤二、取特征引物P3，P4加无菌水稀释；步骤三、通过PCR反应程序获得扩增产物；步骤四、扩增产物与6×Loading buffer混匀后点于琼脂糖凝胶上，置于紫外灯下观察，拍照并保存；步骤五、照片中显示正品金边土鳖在250 bp~500bp之间有一条清晰条带，其他混淆品在该位置均无条带，阴性无干扰；所述步骤二中，取特征引物P3 5'‑CTGGCTGAGGGTCG‑3'，P4 5'‑ATCTGGGGGGTATG‑3'加无菌水稀释成10μmol/μL，备用。
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