[发明专利]一种利用松萝检测放射性气体氡对植物DNA损伤的评价方法

摘要

一种利用松萝检测放射性气体氡对植物DNA损伤的评价方法，将松萝置于氡室中，置氡完成后提取细胞核，再进行单细胞凝胶电泳实验，采用CASP系统，测量DNA迁移的参数，评价DNA的损伤程度。本发明首次采用松萝做为植物材料，用来反映氡对植物DNA的损伤；采用机械分离和酶处理相结合的方法分离植物茎叶中的细胞核，获得了数量适中的完整细胞核，解决了彗星实验在植物领域应用困难的问题；确定了拖尾长度(Tail length)，尾部DNA相对含量(Tail DNA)，尾动量(TM)和Olive尾动量(OTM)能够反映这植物DNA损伤的程度，为研究氡对生物的作用提供更多依据。

主权项

1.一种利用松萝检测放射性气体氡对植物DNA损伤的评价方法，其特征在于，将松萝置于氡室中，置氡完成后提取细胞核，再进行单细胞凝胶电泳实验，采用CASP系统，测量DNA迁移的参数，评价DNA的损伤程度，所述提取细胞核的具体步骤为：①预处理：去掉松萝的根及茎叶表面鳞片；②研磨：松萝茎、叶用双蒸水冲洗、放入预冷的研钵中，快速研磨至碎，并匀浆；③去杂质：用预冷的解剖针挑取匀浆中的杂质出来，再用提取液提取；④提取分离：加入2％纤维素酶和果胶酶混合液，混匀后于4℃静置2h，梯度离心收获；⑤洗涤备用：用磷酸(PBS)缓冲液重复洗涤细胞2次，将细胞悬于PBS缓冲液中，置4℃冰箱，备用。