[发明专利]DNA单分子测序方法与测序系统有效
| 申请号： | 201711280069.4 | 申请日： | 2017-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN108251516B | 公开（公告）日： | 2021-04-02 |
| 发明（设计）人： | 沈玉梅;邵志峰;谭连江;龚兵;李小卫 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12M1/38;C12M1/36;C12M1/00;C07H19/10;C07H19/14;C09K11/06 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 庄文莉 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种DNA单分子测序方法与测序系统，所述DNA单分子测序方法包括如下步骤：S1对基体表面进行修饰，将水溶性双功能连接单元连接于基体表面；然后将引物P1与水溶性双功能连接单元连接，即得固定有引物的基体；S2、将含待测DNA模板、聚合酶、四色荧光标记可逆终止剂的混合溶液置于固定有引物P1的基体上，进行延伸，形成含荧光素的引物/模板复合物；S3、对延伸后的引物/模板复合物进行成像，确定参与延伸的核苷酸碱基种类；S4、将参与延伸的核苷酸的可裂解连接单元断裂，进行下一次延伸；S5、重复上述步骤S2至步骤S4，获得待测DNA模板的碱基序列。本发明能够完美地做到一次测序循环只延伸一个可逆终止剂的效果。 | ||
| 搜索关键词： | dna 分子 方法 系统 | ||
【主权项】：
1.一种DNA单分子测序方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、对基体表面进行修饰，然后将水溶性双功能连接单元连接于基体表面；再将引物P1与所述水溶性双功能连接单元连接，即得固定有引物P1的基体；S2、将含待测DNA模板、聚合酶、四色荧光标记可逆终止剂的混合溶液置于所述固定有引物P1的基体上，进行延伸，形成含荧光素的引物/模板复合物；S3、对延伸后的引物/模板复合物进行成像，确定参与延伸的核苷酸碱基种类；S4、将参与延伸的核苷酸的可裂解连接单元断裂，进行下一次延伸；S5、重复上述步骤S2至步骤S4，获得待测DNA模板的碱基序列。
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