[发明专利]一种利用流式细胞仪进行细胞单克隆化的方法在审

专利信息
申请号: 201711281781.6 申请日: 2017-12-07
公开(公告)号: CN108034632A 公开(公告)日: 2018-05-15
发明(设计)人: 张朗;张肖肖;董慧芳;蔡洁行;周伟昌;陈智胜 申请(专利权)人: 上海药明生物技术有限公司;无锡药明康德生物技术股份有限公司
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人: 郑权
地址: 200131 上海*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开一种利用流式细胞仪进行细胞单克隆化的方法,包括:步骤一、细胞分选:使用清洁后的流式细胞仪进行细胞分选,利用FSC和SSC的信号进行细胞粘连体去除,孔板中每孔分选1个目标细胞。步骤三、细胞培养:将分选后的目标细胞在二氧化碳培养箱静置培养,培养条件为36.5℃和5~6%CO2,培养5~15天,待克隆恢复。采用本发明的方法,单克隆率达到99.5%。
搜索关键词: 一种 利用 细胞 进行 单克隆 方法
【主权项】:
1.一种利用流式细胞仪进行细胞单克隆化的方法,其特征在于,包括步骤:1.1分选细胞准备:将目标细胞进行离心,使用传代培养基重悬,使细胞密度为1 E5~1E6cells/mL,将细胞用滤网过滤后上样;1.2分选参数设置:设置喷嘴尺寸为85或100μm,Window extension设置为1~3ms,上样流速设置为1~11;1.3单细胞分选:利用FSC和SSC的信号进行细胞粘连体去除,孔板中每孔分选1个细胞。
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