[发明专利]一种利用特征多肽制备Smad2蛋白特异性抗体的方法及其应用有效
| 申请号： | 201711315309.X | 申请日： | 2017-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN107973853B | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 高鹏飞;郭晓红;曹果清;刘剑锋;李步高;王效京;刘宏 | 申请（专利权）人： | 山西农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/22 | 分类号： | C07K16/22;C07K16/06;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京栈桥知识产权代理事务所(普通合伙) 11670 | 代理人： | 刘亚娟 |
| 地址： | 030801 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用特征多肽制备Smad2蛋白特异性抗体的方法及其应用，所述特征多肽是由SEQ ID NO：1氨基酸序列组成；SEQ ID NO 1：WLDKVLTQMGSPSVR。利用特征多肽制备Smad2蛋白特异性抗体，包括以下步骤：S1：用所述特征多肽与KLH偶联作为免疫抗原，用所述特征多肽与BSA偶联作为检测抗原；S2：用PBS将免疫抗原与检测抗原分别稀释为1mg/ml，分装冷冻于‑20℃冷藏；S3：分别用所述免疫抗原与检测抗原免疫动物；S4：采集被免疫动物的静脉血，离心收集上清；S5：抗体纯化；S6：Elisa法确定抗体效价；将所述特异性述抗体用Westernblot法检测猪骨骼肌细胞中Smad2蛋白的表达，进而判定猪背最长肌的肌肉含量，并可将其应用于猪肉质风味方面的选育过程中的辅助选择，在猪种质利用方面具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 特征 多肽 制备 smad2 蛋白 特异性 抗体 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种利用特征多肽制备Smad2蛋白特异性抗体的方法，其特征在于，所述特征多肽是由SEQ ID NO：1氨基酸序列组成；所述制备方法包括以下步骤：S1：用所述特征多肽与KLH偶联作为免疫抗原，用所述特征多肽与BSA偶联作为检测抗原；S2：用PBS将免疫抗原与检测抗原分别稀释为1mg/ml，分装冷冻于‑20℃冷藏；S3：分别用所述免疫抗原与检测抗原免疫动物；S4：采集被免疫动物的静脉血，4℃放置过夜，4℃、10000rmp离心30min，收集上清；S5：抗体纯化；S6：Elisa法确定抗体效价；SEQ ID NO 1：C‑SEDTEEEEEDEDQDYS‑NH2。
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