[发明专利]杂交瘤细胞株及其产生的抗体和制备方法有效
| 申请号： | 201711329942.4 | 申请日： | 2017-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN108004215B | 公开（公告）日： | 2021-01-15 |
| 发明（设计）人： | 刘卫晓;李亮;金芜军;宛煜嵩;苗朝华;黄卫红;董美;高进;王迪;胡晓颖 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C12N15/06;C07K16/12;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京知汇林知识产权代理事务所(普通合伙) 11794 | 代理人： | 董涛 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了杂交瘤细胞株及其产生的抗体和制备方法，杂交瘤细胞株1F9‑1F5和杂交瘤细胞株2G3‑1D7，已依次于2017年10月11日和2017年11月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号依次为CGMCC No.14725和CGMCC No.14733，所述杂交瘤细胞株的制备方法，包括以下步骤：a)通过原核表达得到Vip3Aa20重组蛋白；b)免疫动物：将Vip3Aa20重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)细胞融合：收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)细胞建株：通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5‑7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存，所述杂交瘤细胞株分泌的单抗为实现抗虫蛋白Vip3Aa20在转基因玉米MIR162中的定性、定量检测奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 杂交瘤 细胞株 及其 产生 抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a)通过原核表达得到Vip3Aa20重组蛋白；b)免疫动物：将Vip3Aa20重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)细胞融合：收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)细胞建株：通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5-7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存。
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