[发明专利]一种甘薯紫外光受体UVR8基因及其克隆方法在审
申请号: | 201711350987.X | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN108103072A | 公开(公告)日: | 2018-06-01 |
发明(设计)人: | 李国良;邱永祥;邱思鑫;林赵淼;许泳清;刘中华;张鸿;李华伟;纪荣昌;罗文彬;汤浩 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院作物研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12Q1/6806 |
代理公司: | 福州市鼓楼区京华专利事务所(普通合伙) 35212 | 代理人: | 林晓琴 |
地址: | 350000 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明提供一种甘薯紫外光受体UVR8基因及其克隆方法。所述甘薯紫外光受体UVR8基因,核苷酸序列如SEQ.NO.4所示,其克隆方法包括以下步骤:(1)cDNA第一链的合成;(2)UVR8保守序列的同源克隆;(3)UVR8 3’端的扩增;(4)UVR8 5’端的扩增;(5)序列拼接。采用这种方法不需要亲缘关系较近的物种,只要有同源基因,就可以通过设计多个兼并碱基完成核心片段的克隆,该方法同样适用于其它植物的基因克隆。而且在5端克隆中,不需要用磷酸化酶去除mRNA的磷酸集团,再在连接酶连接接头引物,而是根据M‑MuLV逆转录酶的特性,在逆转录RNA时在3’端加上3‑5个C,然后设计引物末端加上3‑5个G与之配对,完成逆转录过程。这种方法简便,节约时间和成本,成功率较高。 | ||
搜索关键词: | 克隆 紫外光 甘薯 逆转录 扩增 基因 核苷酸序列 保守序列 核心片段 基因克隆 连接接头 磷酸化酶 逆转录酶 亲缘关系 设计引物 同源基因 序列拼接 连接酶 磷酸 碱基 去除 引物 配对 同源 成功率 合成 物种 节约 | ||
【主权项】:
1.一种甘薯紫外光受体UVR8基因,其特征在于:核苷酸序列如SEQ.NO.4所示。
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