[发明专利]一种治疗鱼鳃烂病饲料的制备方法

摘要

本发明公开了一种治疗鱼鳃烂病饲料的制备方法，属于饲料领域。本发明从先大黄中提取对嗜水气单胞菌、爱德华氏菌有抑制作用的纯化菌种，对其进行发酵培养，主要抑制鱼烂鳃细菌细胞线粒体呼吸电子传递，抑制菌体糖及糖代谢中间产物的氧化和脱氢过程，影响组织细胞生命活动所需能源的供应，并与DNA结合，干扰其模板功能，抑制蛋白质和核酸合成，降低生物膜的稳定性，干扰能量代谢的酶促反应，从而达到抑菌杀菌消炎的作用，其可替代抗生素类药物预防发病，不会引起鱼类产量及品质下降。本发明解决了目前治疗鱼烂鳃病饲料添加抗生素来预防发病，长期使用会产生抗药性，且治疗鱼烂鳃病饲料作用时间较短，不能长效保护的问题。

主权项

一种治疗鱼烂鳃病饲料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：（1）取富硒平菇干燥，粉碎，过80目筛，收集过筛颗粒物B，取过筛颗粒物A、过筛颗粒物B按质量比2：2：25加入蒸馏水混合，调节pH至5~5.5，加入纤维素酶，酶解，灭酶，取灭酶液按质量比1：15加入蒸馏水，调节pH至9.0~9.2，加入碱性蛋白酶，提取，离心，取上清液，冷冻干燥，得营养粗粉，备用；（2）取鲜大黄洗净，置于无菌水浸泡1~2min，再置于质量分数为10%的次氯酸钠溶液中浸泡10~15min，取出用无菌水冲洗，将大黄从纵横两个方向切成4块，分别接种至PDA固体培养基中培养，挑取菌径最大的菌落划线接种至PDA固体培养基中，重复2~3次，得到纯化菌落，取纯化菌落按质量比1：5加入无菌水中，振荡摇匀，按5%的接种量接种至发酵培养基中培养，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物，备用；（3）取蟾饲五谷虫干燥，按质量比1：10加入蒸馏水，于95~100℃保持1~2h，取出处理后蟾饲五谷虫按质量比1：2加入磷酸盐缓冲液，搅拌混合，静置，离心，取上清液A过0.22μm滤膜过滤，取滤液按质量比1：9加入正己烷萃取，取萃取液按质量比1：9加入乙酸乙酯萃取，离心，取上清液B按质量比5：3加入硫酸铵，静置，离心，收集沉淀，冷冻干燥，得干燥物B按质量比10：2：3加入鼠尾藻粉末和鱼粉混合，得混合物；（4）取明胶、褐藻酸钠按质量比1：1：25加入水中混合，得混合液，按质量份数计，取20~30份步骤（1）备用的营养粗粉、12~15份步骤（2）备用的干燥物A、4~7份混合物、3~5份混合液混合，研磨搅拌，调节pH至3.5~4.5，取搅拌混合物按质量比1：2加入50~55℃蒸馏水，于4~5℃条件下再加入搅拌混合物质量1~2%的质量分数为4%戊二醛溶液，保持15min，静置，取沉淀，用蒸馏水冲洗，真空干燥，即得治疗鱼烂鳃病饲料。